摘要
随着鱼类等养殖的集约化程度的提高,以及各方面条件的日益恶化,水产病害类型增加及日益严重,制约了水产事业的健康发展。为了预防与治疗各类水产动物疾病,抗生素和化学合成药物的滥用现象较为普遍,造成了药物残留和抗药性等问题,给人类健康造成了潜在威胁,因此寻求能有效防治水产动物疾病而且安全的绿色药物受到越来越广泛的关注。本研究通过已经构建的鱼类精密肝切片损伤模型,研究黄芩甙对鲫鱼肝损伤的保护作用,旨在为应用黄芩甙等中草药防治鱼类肝病提供理论依据。 本实验用浓度为8mM四氯化碳(CCl4)来构建鲫鱼肝切片损伤模型,损伤前(前处理)、损伤后(后处理组)、损伤前后(前后处理)分别用不同浓度的黄芩甙(0.05mg/mL、0.1 mg/mL及0.2mg/mL)进行处理,收集培养上清及肝切片。检测各组上清液和肝切片匀浆中的生化指标如总抗氧化能力(T-AOC)、谷丙转氨酶(GPT)、过氧化氢酶(CAT)、谷草转氨酶(GOT)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物岐化酶(SOD)、乳酸脱氢(LDH)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、丙二醛(MDA)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽-S转移酶(GST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、三磷酸腺苷酶(ATP)的活性,细胞色素P450(CYPs)如CYP1A、CYP3A以及细胞因子如白介素1β(IL-1β)、核因子-κB(NF-κB)、白介素-6(IL-6)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达量来评价黄芩甙的保肝作用。研究结果表明,黄芩甙前处理组和前后处理组的中、高剂量组以及后处理组对肝切片的保护作用较好,其他实验组也都抑制了CCl4对肝切片的损伤。黄芩甙显著降低了GOT、GPT、AKP、LDH的溢出量和MDA的生成,提高了抗氧化酶SOD、T-AOC、CAT、GSH-Px、GST的活性,增加了肝切片中TP、Alb及ATP的含量;另外,黄芩甙对CYP1A、CYP3A、c-Rel以及其下游炎症因子IL-1β、IL-6、iNOS的基因表达都有显著性抑制。此外,本实验用1,1-二苯基-2-苦基苯肼基自由基(DPPH)法评价了黄芩甙清除自由基的能力,结果表明黄芩甙在较低浓度时就可以显著地清除自由基。 结论:黄芩甙可以明显降低四氯化碳对鱼类肝组织损伤,抑制体内多种脂类物质的过氧化和免疫炎症反应,进而增强了鲫鱼肝细胞的活力以及其抗氧化性。黄芩甙可以作为鱼类保肝药物,用来防治鱼类疾病。