本试验以湖羊为研究对象，根据GenBank中已知的小鼠、人等的Lats2基因序列的CDS区设计引物，利用基因克隆技术克隆出湖羊Lats2基因的CDS区序列。对获得的Lats2基因CDS区序列进行了生物信息学分析，分析了与其它物种的同源性，预测其蛋白的二级结构及其理化性质等。利用载体构建和细胞转染技术，成功构建了pEGFP-C1-Last2真核表达载体，并转染湖羊骨骼肌卫星细胞，探究Lats2基因过表达后的骨骼肌卫星细胞变化。利用荧光定量PCR技术，分析了Lats2基因在湖羊不同性别、不同生长阶段、不同肌肉组织中的相对表达。本研究为探讨Lats2基因在湖羊骨骼肌发育过程中的机制提供了理论基础。本研究获得了以下结果: 1.成功获得湖羊Lats2基因CDS区全长3048bp，包含了起始密码子ATG和终止密码子TAG。同源性分析发现，湖羊Lats2基因序列与野猪、人、家鼠、褐鼠、非洲爪蟾和斑马鱼的同源性分别为82.2％、78.0％、75.3％、74.9％、58.9％、36.1％;氨基酸序列同源性为80％、75.6％、72.9％、73.3％、56.3％、61.0％;其编码1016个氨基酸，分子量为110398.2Da，其蛋白为不稳定蛋白，无潜在的信号肽剪切位点;其蛋白包含2个从内向外的强跨膜螺旋区，6个从外向内的6个强跨膜螺旋区，存在4个潜在的糖基化位点和45个磷酸化位点，亚细胞定位主要存在于细胞核，有1个S-TKc、1个S-TK-X结构域; 2.Lats2基因在湖羊肌肉中的时空表达分析中，Lats2基因在趾长伸肌中的相对表达最高;在不同生长阶段的表达分析中，Lats2基因在二日龄中表达最低，二月龄、六月龄表达相对较低;在不同性别相对比较中，表现为公羊的相对表达量高于母羊;Lats2基因与Lats、YAP1、MSTN、MyoG、MyHCⅠ、MyHCⅡA和MyHCⅡX基因的关联分析结果中表明，Lats2基因可能与肌肉生长发育存在一定的联系; 3.成功构建了Lats2基因的真核表达载体pEGFP-C1-Lats2，并成功的将Lats2和Lats1基因真核表达载体转染到湖羊骨骼肌卫星细胞中，并在细胞中表达。过表达Lats2后，发现Lats1、MSTN、MyoG基因的表达增加，而YAP1、MyHCⅠ、MyHCⅡA、MyHCⅡX基因的表达下降，但均差异不显著(P＞0.05);过表达Lats1后Lats2基因的表达增加，而YAP1、MSYN、MyoG、MyHCⅠ、MyHCⅡA和MyHCⅡX基因的表达下降，但均差异不显著(P＞0.05)。
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