摘要
研究背景:白细胞介素（IL）-33是2005年首次发现的IL-1家族的新成员，广泛存在于人类多个组织器官中，主要表达于内皮细胞、上皮细胞的细胞核内，当组织受损时，由细胞内分泌至细胞外，并在IL-1受体辅助蛋白（IL-1RAcP）的参与下与特异性受体ST2结合，激活核转录因子（NF）-κB、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路，产生一系列下游炎症因子，而可溶性ST2（sST2）则作为诱骗受体，抑制炎症反应。IL-33的作用与IL-1α和高迁移率族蛋白B1（HMGB1）类似，被称为内源性警报素。目前研究发现，IL-33/ST2信号通路参与了包括炎症、肿瘤、过敏性及风湿免疫性等多种疾病的发生发展。 系统性红斑狼疮（SLE）是一种累及多个系统的、体内存在多种自身抗体的自身免疫性疾病，且多累及肾脏。已有研究发现SLE患者血清sST2与疾病活动度、抗ds-DNA抗体正相关，与C3负相关。另一方面，在急、慢性肾脏损伤中，血清IL-33或sST2异常升高，抗IL-33抗体可减轻MRL/lpr小鼠肾炎的病情。因此，目前认为IL-33/ST2信号通路与系统性红斑狼疮的发病相关，可能介导了肾脏纤维化损害，但是具体机制尚未明确。 目的: 1、探讨SLE患者血清中IL-33、sST2的表达及其与疾病活动度、相关临床指标的关联。 2、探讨IL-33在肾脏的储备细胞及其与狼疮肾炎的关联。 3、体外探讨IL-33对人肾脏细胞的影响。 材料和方法: 1、纳入50例2014年1-12月于广州医科大学附属第二医院风湿免疫科住院的SLE患者（46例女性和4例男性），同时选取性别、年龄匹配的健康对照者30例。所有患者均有完整的临床资料，于清晨空腹抽血留取血清，ELISA检测SLE患者和健康对照者血清IL-33、sST2的表达水平。 2、取SLE患者肾组织穿刺石蜡切片，通过间接免疫荧光染色定位IL-33在肾脏的储备细胞。 3、5例有肾损害临床表现（血尿/蛋白尿）并于住院期间行肾组织穿刺活检的SLE患者，病理均证实为狼疮肾炎。取肾穿刺组织约0.3×0.1cm，另取肾脏肿瘤标本2例，肾萎缩手术切除标本1例，提取总RNA及总蛋白，分别用实时定量PCR及Western blot方法检测肾组织IL-33基因及蛋白表达水平。 4、体外培养内皮细胞、肾小球系膜细胞及肾小管上皮细胞，分别加入 IL-33、IL-33+IL-12，观察细胞活力，并检测细胞培养上清的炎症因子。 结果: 一、SLE患者血清中IL-33、sST2的表达及其与疾病活动度、相关临床指标的关联 1、SLE患者血清sST2、IL-33浓度及IL-33/sST2比值均高于HC。 2、SLE患者血清sST2浓度与SLEDAI、ESR、24h尿蛋白、甘油三酯正相关，与C3负相关，其中SLEDAI、甘油三酯独立相关。 3、SLE患者血清IL-33浓度与SLEDAI、ESR、24h尿蛋白、CKD分期、甘油三酯正相关，与C3、C4、eGFR、白蛋白负相关，其中SLEDAI、C3、eGFR独立相关。 4、SLE患者血清IL-33/sST2比值与SLEDAI、eGRF正相关，与病程、起病年龄、激素用量、CKD分期、血肌酐、C3、C4、ALB负相关，其中CKD、白蛋白独立相关， CKD3期以上该比值显著下降。 二、IL-33在肾脏的储备细胞及其与狼疮肾炎的关联 1、LN患者肾组织切片见IL-33表达，与CD34阳性细胞内DAPI共表达。 2、LN患者肾脏高表达IL-33，与肾脏肿瘤患者相比无统计学意义。 三、体外探讨IL-33对人肾脏细胞的影响。IL-33刺激可使内皮细胞及肾小管上皮细胞生长受抑，并释放TNF-α、IL-4、IL-5、IL-6、IL-13，以IL-6最多；对肾小球系膜细胞无明显影响。 结论: 1、SLE患者血清IL-33、sST2水平升高，且与疾病活动度及其他能反映SLE病情的多个临床实验室指标相关。 2、IL-33在肾脏的储备细胞之一为肾小球内皮细胞，细胞损伤后可释放IL-33。 3、LN患者肾脏IL-33基因及蛋白水平表达增加。 4、损伤释放的IL-33可通过损伤内皮细胞、肾小管上皮细胞加重肾脏损害，并产生IL-4、IL-5、IL-6、IL-13、TNF-α等细胞因子。
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