摘要
甘蓝型油菜(Brassica napus L.)是世界上重要的油料作物之一，提高产量是油菜育种研究的重要目标。油菜的产量由种植密度和单株产量共同决定，其中种植密度与油菜的株型紧密相关;而单株产量取决于单株角果数、每角果粒数和千粒重三个因子的协调作用。到目前为止，已有大量单株产量构成因子相关QTL被报道，但只有2个QTL通过图位克隆的方法得到基因:即控制千粒重的QTL(BnaA09.ARF18和控制每角果粒数QTL(BnaC9.SMG7b)。李世鹏在克隆甘蓝型油菜每角果粒数主效QTL qSS.C9(BnaC9.SMG7b)的过程中发现，NIL(Y106)每角果粒数显著性增加，但同时千粒重显著下降。这种随着每角粒数增加而千粒重下降的变化可能是Bna C9.SMG7b的一因多效，也可能由其他基因所致。进一步的序列分析显示，在qSS.C9定位区间的BnaC9.RINGb基因可能直接参与调控种子的发育。本研究在此基础上，通过比较基因组学和分子生物学的方法，对qSS.C9定位区间内的候选基因进行了研究分析。主要结果如下: 1.BnaC9.SMG7b基因互补验证:转基因互补实验表明，BnaC9.SMG7b基因对千粒重没有显著影响。这表明可能存在其它基因对NIL(Y106)的千粒重起到调控作用。 2.候选基因分析:对qSS.C9定位区间内的候选基因进行比较测序发现，BnaC9.RINGb在双亲之间存在明显差异;初步的转基因互补试验结果显示，BnaC9.RINGb基因负调控千粒重，使受体材料HZ396的千粒重显著下降，极可能是目标基因。 3.BnaC9.RINGb同源拷贝分析:序列比对结果发现BnaC9.RINGb基因在拟南芥有1个同源基因，甘蓝型油菜中有8个，甘蓝中有3个，白菜中有3个。 4.表达模式分析:GUS染色分析，该基因在拟南芥的子叶、叶片、角果皮、雌蕊和雄蕊中都有表达，亚细胞定位表明该基因表达蛋白定位于细胞核。 5.拟南芥同源基因功能研究:部分ring突变体的角果长、角果宽和每角果粒数显著高于野生型:突变体的千粒重比野生型材料有一定的增加，但并未达到显著水平。
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