摘要
目的：预测并鉴定分析多房棘球绦虫抗原蛋白Emy162及TSP3的B细胞和T细胞（Th1型、Th2型、Th17型）优势抗原表位，为后续抗多房棘球蚴多表位疫苗的研制奠定基础。 方法：⑴Genbank获取 Emy162、TSP3的氨基酸序列后通过生物信息学软件 SOPMA预测二级结构特征，进一步通过在线软件IEDB、SYFPEITHI、Bcepred和 ABCpred预测潜在的T细胞和 B细胞表位。⑵收集Emy162蛋白、TSP3蛋白、PBS分别免疫后的BALB/c小鼠得脾脏淋巴细胞，并用化学合成的抗原小肽进行刺激共培养。通过脾脏淋巴细胞增殖实验、培养上清与病人血清 ELISA实验，鉴定出具有良好免疫原性的B细胞抗原表位。⑶人工合成的T细胞抗原小肽刺激Emy162蛋白、TSP3蛋白、PBS致敏小鼠脾脏淋巴细胞，通过 ELISA、ELISpot、流式细胞术等方法检测Th1、Th2、Th17型细胞因子的表达，鉴定出具有良好免疫原性Th1、Th2、Th17型细胞抗原表位。 结果：①Emy16、TSP3蛋白均存在潜在优势抗原性表位存在。Emy162的8个潜在优势 B细胞表位为E7-13、E19-27、E28-36、E37-48、E78-83、E101-109、E112-121、E129-139；Emy162的6个T细胞潜在优势抗原表位为E7-13、E36-41、E80-89、E87-96、E97-106、E129-139。TSP3的7个B细胞潜在优势抗原表位分别为T18-33、T45-55、T53-63、T64-75、T80-90、T92-104、T110-122；TSP3蛋白的8个T细胞表位是T33-42、T45-55、T53-63、T68-77、T80-90、T92-104、T110-122、T134-144。②Emy162、TSP3蛋白各B抗原表位的抗原性不同。Emy162的3个优势 B抗原表位为 E19-27、E112-121、E129-139；TSP3的3个优势B抗原表位为 T18-33、T45-55、T110-122。③Emy162蛋白各 T抗原表位可诱导不同细胞因子的表达。E7-13、E36-41、E80-89、E129-139为Emy162的Th1型优势抗原表位；E36-41、E87-96、E97-106为Emy162的Th2型优势抗原表位；E36-41、E87-96、E97-106为Emy162的Th17型优势抗原表位。④TSP3蛋白各T抗原表位可诱生不同细胞因子的表达。TSP3的优势 Th1型抗原表位为 T33-42、T45-55、T80-90、T110-122；TSP3的Th2型优势抗原表位为 T45-55、T68-77、T92-104；TSP3的Th17型优势抗原表位为 T53-60、T80-90。 结论：⑴Emy162及 TSP3具有良好的抗原性，并存在潜在优势抗原表位。利用生物信息学的方法预测分析出了 Emy162的8个 B细胞表位和6个T细胞表位，预测分析出 TSP3蛋白8个 T细胞和7个 B细胞表位。⑵Emy162蛋白具有3个优势 B细胞表位、4个Th1型优势抗原表位、3个Th2型优势抗原表位、3个 Th17型优势抗原表位。⑶TSP3蛋白具有3个优势 B细胞表位、4个Th1型优势抗原表位、3个 Th2型优势抗原表位、2个 Th17型优势抗原表位。⑷鉴定出的各优势抗原表位，为后续研制用于免疫预防接种、诊断、治疗的高效多表位疫苗奠定了理论基础。
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