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探索DDAVP联合IL-4对巨噬细胞LPCAT和PAF-AH mRNA的表达影响

张杨

探索DDAVP联合IL-4对巨噬细胞LPCAT和PAF-AH mRNA的表达影响

张杨1
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作者信息

  • 1. 华北理工大学
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摘要

目的:探索DDAVP联合IL-4对RAW264.7细胞系(小鼠单核巨噬瘤细胞)LPCATmRNA和PAF-AH mRNA的表达影响。 方法:本实验共分为四组,即RAW264.7细胞系接受4种不同的培养方法,共培养12.5小时,然后提取细胞总mRNA。IL-4+DDAVP组:先用含IL-4(10 ng/ml)的高糖 DMEM培养基培养 RAW264.7细胞12小时,然后用含 DDAVP(100ng/ml)的高糖DMEM培养基培养30min,提取细胞总mRNA。DDAVP组:先用高糖DMEM培养基培养RAW264.7细胞12小时,然后用含DDAVP(100ng/ml)的高糖DMEM培养基培养30min,提取细胞总mRNA。IL-4组:先用含有IL-4(10 ng/ml)的高糖DMEM培养基培养RAW264.7细胞12.5小时后,然后提取细胞总mRNA。空白对照组:先用高糖DMEM培养基培养RAW264.7细胞12.5小时后,提取细胞总mRNA。将各组mRNA逆转录成cDNA,应用实时荧光定量PCR检测细胞LPCAT mRNA和PAF-AH mRNA的表达水平。表达水平=(Etarget)CTcontrol-CTsample)/(Eref)CTcontrol-CTsample),CTcontrol为actin的扩增循环数, CTsample所测产物 PAF-AH、LPCAT mRNA的扩增循环数, Eref为 actin mRNA的扩增效率,Etarget为所测产物PAF-AH、LPCAT mRNA的扩增效率。应用SPSS17.0软件进行统计分析,计算每组6个样本的?±s,进行方差分析,两组间比较采用LSD t检验以及Dunnett T3 t检验,P<0.05。 结果:四个实验组RAW264.7细胞LPCAT mRNA表达水平分别为:IL-4+DDAVP组为1.23±0.41,DDAVP组为0.77±0.35,IL-4组为0.95±0.42,空白对照组为0.70±0.23,方差分析结果为,F=2.58,方差齐,LPCAT mRNA在四个实验组中差异无统计学意义。四个实验组PAF-AH mRNA表达水平分别为:IL-4+DDAVP组为0.54±0.34,DDAVP组为0.30±0.15,IL-4组为0.30±0.11,空白对照组为0.44±0.34,方差分析结果为,F=1.237,方差齐,四个实验组差异无统计学意义(P>0.05)。 结论:DDAVP联合IL-4可能促进巨噬细胞LPCAT mRNA的表达。

关键词

止血药物/联合治疗/血友病A/巨噬细胞/LPCAT表达/PAF-AH表达

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授予学位

硕士

学科专业

内科学

导师

闫振宇

学位年度

2016

学位授予单位

华北理工大学

语种

中文

中图分类号

R5
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