摘要
在本次研究中，采用榛蘑作为试验原料，对榛蘑多糖的超声波辅助酶法提取、分离纯化所需的试剂以及条件进行摸索。在研究体外降血脂的试验中，将榛蘑干粉、纯化后的榛蘑多糖Z1、Z2以及香菇多糖分别与不同胆酸盐的结合能力作比较，为日后榛蘑多糖的开发奠定了理论基础。 本研究主要内容包括：⑴研究了榛蘑中多糖的提取条件，以榛蘑多糖提取率为指标，采用超声波辅助复合酶（纤维素酶、木瓜蛋白酶）法进行试验。通过单因素试验研究了酶解温度、超声功率、超声时间、液料比、酶解时间、复合酶比例以及加酶量对榛蘑多糖提取率的影响，之后进行响应面优化试验。通过单因素试验，得出了酶解温度50℃、超声功率360 W、超声时间20 min;通过响应面优化试验，得到的最佳提取条件为:加酶量1.9％、复合酶比例2∶1、酶解时间138 min、液料比30∶1(mL/g)。在以上环境下，得出榛蘑多糖的提取率为40.56％。⑵将Sevage试剂加入到需要除蛋白的粗多糖溶液中，将不同除蛋白条件下蛋白质脱除率和多糖保留率当作指标，通过计算得出最佳的工艺条件:氯仿∶正丁醇体积比为5∶1;样液∶Sevage体积比为5∶1;脱蛋白次数为3次、振摇时间为30min。⑶将过氧化氢溶液加入到需要脱色的粗多糖溶液中，将不同脱色条件下的脱色率和多糖保留率当作指标。通过计算得出最佳的工艺条件:脱色温度为50℃;溶液pH值为8.0;脱色时间为3h;过氧化氢添加量为40％。⑷经过脱蛋白及脱色后的榛蘑多糖溶液通过乙醇分级沉淀进行分离，之后采用凝胶层析柱法进一步分离纯化，冷冻干燥后得到Z1、Z2纯多糖。纯化后的榛蘑多糖使用紫外分析光谱进行扫描，表明其不含蛋白质、氨基酸以及核酸;结构的分析采用红外分析光谱法，表明榛蘑多糖Z1、Z2均为β-吡喃多糖;榛蘑多糖Z1、Z2的单糖组成分析采用高效液相色谱法。多糖Z1由半乳糖、甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、阿拉伯糖、岩藻糖组成;多糖Z2由半乳糖、甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、岩藻糖组成。⑸通过体外降血脂试验，对照物的主要成分为辛伐他汀的降血脂药物以及香菇多糖，研究榛蘑干粉、纯化后的榛蘑多糖Z1、Z2对胆酸盐的结合能力的影响。当反应剂量相同时，香菇多糖对不同胆酸盐的结合能力普遍低于榛蘑多糖Z1、Z2对胆酸盐的结合能力。综上所述，证实榛蘑多糖具有降血脂的能力。
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