摘要
目的:观察异丙肾上腺素(Iso)诱导H9c2心肌细胞肥厚中Toll样受体4（TLR4）/激活蛋白1（activator protein-1，AP-1）信号通路及肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素6（IL-6）的改变，探讨研究浙贝母提取物对Iso致心肌肥厚的干预作用及机制。 方法:(1)MTT法检测Iso、浙贝母提取物、卡托普利对H9c2心肌细胞存活率的影响，确定它们的安全浓度范围。(2)在Iso对H9c2心肌细胞安全浓度范围中，设立浓度梯度，筛选出最佳造模浓度。(3)采用结晶紫染色，倒置荧光显微镜观察细胞形态，image-pro plus6.0软件测量各处理组心肌细胞的面积。(4)二辛可酸(BCA)法测定各组细胞总蛋白含量。(5)酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞外液中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素6（IL-6）的浓度。(6)Western blot检测TLR4、AP-1、心钠肽(ANP)蛋白的表达。 结果:(1)Iso对H9c2心肌细胞的安全浓度范围在30μmol/L之内;浙贝母提取物对H9c2心肌细胞的安全浓度范围在2000μg/mL之内;卡托普利对H9c2心肌细胞的安全浓度范围在0.2m mol/L之内。(2)Iso的最佳造模浓度为20μmol/L。(3)模型组中的H9c2心肌细胞表面积高于其他各组，并与正常组的差异有显著性意义(P＜0.001)，浙贝母提取物高剂量组的H9c2心肌细胞表面积有所变小，其对心肌细胞肥厚有保护作用。(4)模型组的总蛋白含量高于其他各组，与正常组的比较差异有显著性意义(P＜0.001)，阳性对照组的总蛋白含量接近于正常组。(5)模型组中细胞培养液中TNF-α、IL-6的浓度升高，高剂量组中的有所降低，并与模型组的差异有显著性意义(P＜0.001)。(6)模型组中ⅡR4、AP-1、ANP蛋白表达上调，高剂量组和阳性对照组中这些蛋白的表达均降低下调。 结论:浙贝母提取物对Iso致H9c2心肌细胞肥厚具有一定的保护作用，其机制可能与减少TNF-α、IL-6的释放，抑制TLR4/AP-1信号通路减轻心肌肥厚的炎症反应有关。
NETL