摘要
目的:五味子为常用的宁心安神中药，同时具有敛阴柔肝之功，研究发现五味子具有潜在抗抑郁作用，但对其抗抑郁作用的化学物质基础和作用机理缺乏系统研究。本研究采用行为药理学和神经生物学手段，研究宁心安神中药五味子及其木脂素类成分、含五味子复方中药JWYQS抗抑郁作用及可能的作用机制，并重点围绕复方JWYQS开展抗抑郁神经生物学机制研究。 方法: (1)采用小鼠急性行为绝望模型（悬尾实验和强迫游泳实验）及自发活动实验，对五味子及其木脂素类成分(SCE、StA、Sch B、Sch A、SCH)进行抗抑郁活性评价;采用5-羟色氨酸(5-HTP)甩头实验和育亨宾毒性实验两种药物相互作用模型，研究SCE、StA、Sch B、SchA、SCH对单胺系统的影响。 (2)采用小鼠急性行为绝望模型、小鼠获得性无助模型，对含五味子复方中药JWYQS抗抑郁活性进行多模型综合评价;围绕单胺假说，采用5-HTP甩头实验、育亨宾毒性实验、PCPA拮抗实验和利血平耗竭实验4个药物相互作用模型，评价JWYQS对单胺能神经系统的影响，并采用高效液相色谱-电化学检测（HLPC-ECD）方法，检测JWYQS对利血平耗竭小鼠不同脑区内单胺递质含量的影响;围绕神经营养和神经可塑性假说，采用蛋白免疫印迹(WB)技术，评价JWYQS对获得性无助小鼠神经营养因子及其相关MEK-ERK-CREB信号通路的影响;围绕炎症假说，采用LPS诱导模型，评价复方药JWYQS对炎症因子及AKT-NF-κB信号通路的影响;并采用酶联免疫法检测JWYQS对获得性无助模型小鼠细胞因子的影响。 结果: (1)在行为绝望模型中，与空白组相比，五味子木脂素类成分SCE、StA、Sch B、SCH均可显著性降低小鼠悬尾的不动时间，StA、Sch B、SchA、SCH可显著性降低小鼠强迫游泳的不动时间;自发活动实验结果显示，实验剂量范围内SCE、StA、Sch B、SchA、SCH对中枢神经系统无明显兴奋或抑制作用。在5-HTP甩头实验中，SCH(10 mg·kg-1)可显著地增加小鼠的甩头行为;在育亨宾毒性实验中，SCE、StA、Sch B、SchA、SCH对小鼠死亡数无增强作用。 (2)在行为绝望模型中，与空白组相比，JWYQS（100～200 mg·kg-1）可显著缩短小鼠悬尾和强迫游泳的不动时间;自发活动实验结果显示，在受试剂量范围内，JWYQS对中枢神经系统无兴奋或抑制作用;在小鼠习得性无助模型中，JWYQS(50～200 mg·kg-1)可显著逆转电击引起的小鼠逃避潜伏的延长及逃避失败次数的增加。在5-HTP甩头测验中，JWYQS(100、200 mg·kg-1)可显著地增加小鼠的甩头行为;在育亨宾毒性实验中，JWYQS(50～200 mg· kg-1)对小鼠死亡数无增强作用;在PCPA拮抗实验中，小鼠强迫游泳结果显示PCPA可取消JWYQS(100、200 mg·kg-1)的抗抑郁作用;在利血平耗竭实验中，JWYQS(100、200 mg·kg-1)可逆转利血平耗竭单胺递质导致的眼睑下垂、但对肛温降低和运动不能无影响，同时降低利血平耗竭小鼠海马区5-HIAA含量及5-HIAA/5-HT的代谢转换率;WB结果表明，JWYQS(50～200 mg·kg-1)可显著逆转获得性无助小鼠海马区BDNF、TrkB、p-ERK、p-CREB和p-GSK3β蛋白表达的减少;在LPS诱导抑郁模型中，JWYQS(50～200 mg·kg-1)可显著的缩短LPS引起的小鼠悬尾和强迫游泳不动时间的延长，逆转蔗糖偏嗜度的降低，逆转LPS诱导小鼠海马区促炎细胞因子IL-1β和TNF-α的增加，并可显著性逆转LPS诱导小鼠海马区p-AKT蛋白表达的减少和NF-κB蛋白的增加;此外，JWYQS(50～200 mg·kg-1)可显著逆转获得性无助小鼠海马区促炎细胞因子IL-1β、IL-1O的增加和抗炎细胞因子IL-4的降低， 结论: (1) SCE、StA、Sch B、Sch A、SCH在小鼠的行为绝望模型上具有显著的抗抑郁作用，其中SCH的作用机制可能与增加脑内5-HT含量有关。 (2) JWYQS在多个动物模型上具有显著地抗抑郁作用，其作用机制可能与增强脑内5-HT神经功能、增强神经营养功能及调节神经免疫功能密切相关。
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