摘要
续断为川续断科植物川续断Dipsacus asper Wall. ex Henry的干燥根，具有补肝肾、强筋骨、续折伤、止崩漏、安胎等功效，用于治疗风湿痹痛、腰膝酸软、跌扑损伤、崩漏、胎漏等症。续断配方颗粒是由符合炮制规范的续断饮片，经现代化的工艺提取、浓缩、干燥、制粒加工而成，具有服用方便，便于储存携带等特点。为了保证续断配方颗粒的质量，确保其用药的安全性和有效性，本论文对续断“标准煎液”的工艺进行了优选，确定了工艺参数；测定了采用优选工艺制备的10批续断“标准煎液”的出膏率以及川续断皂苷VI的含量，并规定了出膏率和川续断皂苷VI含量的变化范围。对以此工艺生产的10批续断配方颗粒进行了川续断皂苷VI的含量测定以及“标准煎液”和配方颗粒的指纹图谱研究，并对两者对照图谱进行对比。 目的：确定续断“标准煎液”工艺，制备10批续断“标准煎液”并测定出膏率和川续断皂苷VI的含量，规定出膏率和川续断皂苷VI含量的变化范围。建立续断配方颗粒的含量测定和指纹图谱分析方法，对比“标准煎液”和配方颗粒的对照图谱，为控制续断配方颗粒的质量和临床应用研究提供参考。 方法： 1.采用单因素试验，以出膏率和川续断皂苷VI的含量为指标对提取加水量、煎煮时间、煎煮次数等因素进行单因素考察，通过工艺验证试验确定工艺，以该工艺制备10批续断“标准煎液”，测定10批续断“标准煎液”的出膏率和川续断皂苷VI的含量，并以均值加减3倍标准偏差（SD）来规定出膏率和川续断皂苷VI含量的变化范围。 2.采用高效液相色谱仪（HPLC）对川续断皂苷VI的含量进行测定，以依利特SinoChrom ODS-AP柱（4.6×150mm，5μm）为色谱柱；流动相：乙腈-水（30:70）；检测波长为212nm；流速：1mL/min；柱温：35℃；进样量10μL。 3.采用超高效液相色谱仪（UPLC）对10批续断“标准煎液”和配方颗粒的指纹图谱进行研究并对比两者对照图谱，以Waters ACQUITY UPLC BEH C18（2.1x100mm，1.7μm）为色谱柱；流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱；检测波长为220nm；流速为0.3mL/min；柱温为40℃；进样量为1μL。 结果： 1.最佳工艺为：一煎加水13倍，浸泡30min，武火煮沸，文火保持微沸60min，趁热用100目筛网分离煎液；二煎加水11倍，武火煮沸，文火保持微沸40min，趁热用100目筛网分离煎液，合并两次煎液，迅速冷却。50℃真空减压浓缩密度约为1.1时，冷冻干燥成干膏粉。10批续断“标准煎液”出膏率的范围为37.9%~42.7%，以均值加减3倍SD来规定出膏率的范围为36.5%~44.0%。川续断皂苷VI的含量范围为42.04mg/g~62.54mg/g，以均值加减3倍SD来规定川续断皂苷VI的含量范围为37.39m g/g~76.23mg/g。 2.川续断皂苷Ⅵ进样量在0.4840～4.8400μg范围内线性关系良好， r=0.9999，平均回收率为98.49%，供试品溶液在24h内稳定，重复性川续断皂苷VI含量的RSD为1.13%。10批续断配方颗粒中川续断皂苷VI的平均含量为59.89mg/g。 3.建立了10批续断“标准煎液”和配方颗粒的指纹图谱，标定了17个共有峰，通过与对照品图谱比对，指认了绿原酸、咖啡酸、马钱苷、川续断皂苷VI4个成分，10批续断“标准煎液”的相似度均在0.9以上，10批续断配方颗粒的相似度均在0.95以上。 结论：优选的续断“标准煎液”工艺稳定可靠、重复性好，所规定的出膏率和川续断皂苷VI含量的范围合理，可为配方颗粒的生产提供指导。所建立的续断配方颗粒的含量测定和指纹图谱分析方法准确、稳定、重复性好。通过续断“标准煎液”和配方颗粒的对照图谱比对，反映出两者化学成分基本相同，具有质量一致性，可为全面控制续断配方颗粒的质量和临床应用研究提供参考。
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