摘要
目的： 检测长链非编码RNA母系表达基因3（maternally expressed gene3 MEG3）在小儿先天性巨结肠（Hirschsprung’s disease HD）病变肠管中的表达情况，并通过观察过表达MEG3对人神经母细胞瘤细胞株（SK-N-BE(2)）增殖、克隆、侵袭及凋亡的影响，探讨MEG3在HD中的作用及作用机制。 方法： 用RT-qPCR方法检测17例HD患儿病变结肠组织和17例非HD也无肠道畸形婴儿正常结肠组织中MEG3的表达量，用PASS检测其效能，并用ROC曲线下面积（AUC）及95%可行区间表示MEG3在HD中的诊断效能，评价MEG3在HD中的诊断价值。应用细胞培养及转染技术，在SK-N-BE(2)细胞中转染MEG3过表达质粒，设立MEG3高表达组、空载体组及对照组，并应用CCK-8、Edu细胞增殖实验、平板克隆技术、TRANSWELL技术、流式细胞实验分别检测过表达MEG3对SK-N-BE(2)细胞的增殖能力、克隆能力、侵袭能力及凋亡情况的影响。 结果： RT-qPCR结果显示：HD患儿病变结肠组织中MEG3表达量较正常结肠组织中MEG3表达量明显升高（P<0.01），效能检测显示效能达标，实现100%的检测功率，ROC曲线显示：曲线下面积（AUC）为84.9%，（95%可行区间71.6%-98.3%），最佳阳性截断值(cut off value)为1.46，灵敏度为82.4%，特异度为82.4%。MEG3过表达质粒转染SK-N-BE(2)细胞，转染效率为35.4%，达到转染要求，MEG3过表达组细胞的增殖能力、克隆能力以及侵袭能力与空载体组及对照组比较明显降低（P<0.01），流式细胞检测显示：MEG3高表达组与空载体组及对照组比较细胞凋亡明显增加（P<0.01）。 结论： HD患儿病变结肠组织中MEG3表达量明显升高，MEG3可能通过调控SK-N-BE(2)细胞的增殖、克隆、侵袭与凋亡参与HD的发病，在HD的早期诊断与治疗中具有一定临床价值。
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