摘要
伪狂犬病(Pesudorabies，PR)是由伪狂犬病毒(Pesudorabies Viurs，PRV)所引起的一种急生烈性传染病，又称奥叶兹基氏病(Aujeszkyps Disease，AD)。属于高度致死性疾病，主要症状包括奇痒、发热和脑脊髓炎。感染谱极广，可感染如猪、马、牛、羊、犬、猫、鼠及多种野生动物。本病的主要宿主和传染源是猪，健康猪与患病猪或带毒猪直接接触后可感染本病。疫苗接种是防治和根除PR的主要措施，经典的Bartha株弱毒活疫苗在伪狂犬病的防控和根除中发挥了重要的作用。目前防控伪狂犬病的活疫苗对猪是安全的，但是对其它种属动物可能是致病的。国内猪场的环境比较复杂，常有鼠患，猪的下脚料以及相关废弃料不能保证不被周围的犬、猫及鼠等吃到，如果这些活疫苗对非靶动物是致病的，就有可能造成犬、猫及鼠的感染，存在一定的生物安全风险。为了检验伪狂犬病活疫苗对其它种属动物的安全性，本实验以BALB/c小鼠作为实验对象，评价了商品化的Bartha疫苗株、HB-98疫苗株及本实验室构建的缺失TK基因的Bartha-TK-毒株对小鼠的安全性;并将这些疫苗株在小鼠上连续传代后再感染猪，研究是否会对猪产生致病性，来初步评估现有的TK+/TK-猪伪狂犬病活疫苗使用的生物安全风险。 本研究测定了猪伪狂犬病活疫苗Bartha、HB-98及Bartha-TK-在PK-15和NRK细胞上的一步生长曲线，结果显示在PK-15细胞上Bartha株增殖最快，在20h以后，HB-98株的滴度明显低于另两种疫苗株;在NRK细胞上HB-98株增殖最快、滴度最高，Bartha-TK-在24h以后才开始有增殖，而且滴度最低。比较了三种疫苗株分别在两种细胞上的空斑形态，结果显示三种疫苗株在两种细胞上形成的空斑犬小都不均一，PK-15细胞上三种疫苗株的最大空斑直径大小基本相同，NRK细胞上HB-98株的空斑明显比另两种疫苗株的大。 本研究进行了猪伪狂犬病活疫苗Bartha、HB-98及Bartha-TK-在小鼠上的安全性评价试验，接种小鼠，研究猪伪狂犬病活疫苗对小鼠的安全性;在小鼠上连续传五代，最后将第五代感染小鼠的脑组织混悬液上清接种2剧龄的仔猪，研究猪伪狂犬病活疫苗在小鼠上连续传五代后再感染猪致病性是否会增强。结果显示Bartha-TK-和HB-98株对小鼠安全，而Bartha株对小鼠不安全;Bartha-TK-和HB-98株在小鼠上传代一次后检测不到PRV，因此没有继续进行在小鼠体内的传代实验，Bartha株在小鼠上传了五代后再接种仔猪，结果显示仔猪没有明显的临床症状，说明通过在小鼠上连续传5代再株接种仔猪，对仔猪仍无致病性。
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