摘要
背景：瘢痕疙瘩是一种以成纤维细胞过度增殖和胶原为主的细胞外基质（ECM）成分过度沉积为主要特征的皮肤良性肿瘤。在瘢痕疙瘩成纤维细胞中，核因子-κB(nuclear factor-κB，NF-κB)信号通路的活化已被证实，NF-κB信号通路的异常活化可能在瘢痕疙瘩形成中起重要作用。肿瘤坏死因子α刺激基因-6(tumor necrosis factorα stimulated gene6,TSG-6)是具有抗炎作用的细胞因子，TSG-6蛋白局部注射抑制了兔耳瘢痕的增生，但TSG-6蛋白抑制瘢痕形成的机制尚不清楚。 目的：探讨TSG-6预处理对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡及NF-κB信号通路的影响。 方法：标本人瘢痕疙瘩及同源正常皮肤共3例，采用酶消化法分离纯化得到人瘢痕疙瘩成纤维细胞（keloid fibroblasts, KFs)，组织块贴壁法分离纯化得到正常皮肤成纤维细胞(normal skin fibroblasts，NFs), MTT法检测rhTSG-6蛋白对KFs和NFs的增殖抑制作用，计算rhTSG-6对KFs的半数抑制浓度（half maximal inhibitory concentration of a substance，IC50），实验分为KFs空白对照组，rhTSG-6处理组KFs，NFs空白对照组，rhTSG-6处理组NFs，流式细胞术检测空白对照组与接近半数抑制浓度 rhTSG-6蛋白处理组细胞周期及细胞凋亡情况。Western blot检测KFs中 IκBα，p-IκBα,活化 caspase3及 caspase8的表达。凝胶电泳迁移率实验（Electrophonetic mobility shift assay, EMSA）检测各组细胞NF-κB DNA结合活性。 结果：rhTSG-6在体外对KFs增殖有明显抑制作用（IC50接近300ng/mL），细胞周期阻滞，细胞凋亡率增高，差异有统计学意义（P﹤0.05），与此同时，rhTSG-6在体外对NFs增殖情况，细胞周期及细胞凋亡影响不明显；Western blot法检测显示rhTSG-6处理组KFs中IκBα表达增加，p-IκBα表达减少，活化caspase3和caspase8表达明显增多。EMSA结果显示rhTSG-6实验组NF-κB DNA结合活性明显降低。 结论：TSG-6在体外可能通过抑制NF-κB信号通路活性进而抑制KFs增殖并促进其凋亡。
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