摘要
香蕉是世界第一大贸易水果和重要经济作物，具有很高的经济价值。香蕉枯萎病是香蕉产业的毁灭性病害，严重威胁着香蕉产业的健康发展，目前尚无行之有效的根治方法。Snakin是近年来新兴的一类抗菌肽，具有广谱抗生物逆境和非生物逆境活性，在促进植物生长发育、提高植物抗病能力等方面发挥着重要的作用。在前期的研究中，发现香蕉Snakin基因的表达受枯萎病菌诱导，暗示Snakin可能在香蕉抵御枯萎病菌侵染过程中发挥着一定的作用。印度梨形孢是一种类菌根真菌，其对植物的促生增抗效应已在多种植物中得到证实，但目前未有其在香蕉上应用的报道。印度梨形孢定殖会影响植物GA代谢相关基因的表达，而Snakin属于GASA超基因家族，其表达受GA诱导，暗示印度梨形孢可能会对Snakin基因的表达有一定的影响进而影响香蕉的抗病能力。本试验拟通过比较有/无印度梨形孢定殖的香蕉的生长状况、抗枯萎病能力以及Snakin基因的表达情况研究其对香蕉生长及抗病能力的作用，以期为印度梨形孢在香蕉上的开发与应用提供技术支撑和理论依据，具体结果如下： 1.以天宝蕉、福州粉蕉1号、三明野生蕉和福州芭蕉为材料，研究了不同印度梨形孢处理的香蕉组培幼苗和移栽大苗生长状况差异，结果显示印度梨形孢能够显著促进组培幼苗生根，但对不同的香蕉种质的促进效果存在一定的差异。 2.以天宝蕉、福州粉蕉1号、三明野生蕉和福州芭蕉为材料，研究了有/无印度梨形孢定殖的香蕉植株在接种Foc TR4后的症状和相关抗氧化酶的活性，结果显示接种了印度梨形孢的香蕉抗氧化酶活性均高于对照组，同时印度梨形孢定殖还推迟了天宝蕉病症显现，说明印度梨形孢可能是通过提高香蕉的抗氧化能力进而提高其枯萎病抗性。 3.分别从天宝蕉、福州粉蕉1号和三明野生蕉中扩增获得7个Snakin基因家族成员的cDNA序列。发现只有三明野生蕉中存在所有Snakin基因的正常转录本，暗示Snakin家族基因在三明野生蕉中的正常表达可能与三明野生蕉较高的抗枯萎病能力有关。通过对三明野生蕉的Snakin家族蛋白序列进行了生物信息学分析发现：Snakin蛋白家族各成员均为碱性蛋白质，均属于GASA超家族，具有GASA结构域；均具有信号肽和跨膜结构且无螺旋卷曲结构；SN1均为亲水性蛋白，SN2为疏水性蛋白。 4.利用实时定量PCR技术研究了健康、轻度感染、中度感染和重度感染枯萎病的天宝蕉植株不同组织部位中Snakin基因的表达情况，发现Snakin基因在假茎和根部的表达受枯萎病诱导显著而在叶片中变化不明显，说明枯萎病菌侵染可以诱导Snakin的表达。通过分析有/无印度梨形孢定殖的天宝蕉接种枯萎病菌前后Snakin基因的表达情况发现：印度梨形孢定殖对Snakin基因的表达产生了一定影响，同时感染枯萎病后有/无定殖印度梨形孢的天宝蕉Snakin基因的表达差异显著。说明印度梨形孢可能是通过调控天宝蕉Snakin基因的表达进而提高其对枯萎病的抗性。
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