摘要
目的：研究建立稳定可靠、经济实用、相对规范的若干糖尿病及其慢性并发症动物模型，优化造模条件，提高造模的成功率和模型的稳定性;探索创建新的符合中医证候特征的糖尿病病证结合动物模型;逐步形成较为系统、完整、规范的糖尿病及其并发症中医药动物模型药物功效评价平台体系。以适应长期给药才能体现药效的中药药效筛选和评价之所需，为中医糖尿病辨证论治相关研究和新药开发提供实验支撑。 方法：以中西医理论为指导，以常用的四氧嘧啶为造模的基础药物，以常用的小鼠、大鼠为研究载体，以成模率和血糖稳定性为基本指标，结合有关中医证候和西医特征指标，采用药理、病理、生化、免疫及分子生物学方法与技术，筛选优化糖尿病及其若干并发症动物模型的造模条件，通过对造模药物的用量、用法、给药途径、造模动物的品种、禁食时间等影响造模成败的因素进行筛选优化，探明并优化造模的实验条件因素;对优化的动物模型进行较长时间的稳定性考察;并运用相关中药对所建模型进行重复反证，考察模型的可靠性与药效指标的适用性。最终获得若干个优化的糖尿病及其并发症动物模型与中医病证结合动物模型。 结果：①影响四氧嘧啶致小鼠糖尿病的因素有小鼠的品种、性别、周龄、四氧嘧啶溶媒、给药途径、给药剂量、禁食时间等，其中四氧嘧啶用量、给药途径、禁食时间、小鼠品种是主要因素。②影响四氧嘧啶致大鼠糖尿病的因素有大鼠的品种、性别、周龄、给药途径、给药剂量、禁食时间等，其中四氧嘧啶用量、给药途径、禁食时间、大鼠品种是主要因素。③血糖值大于18mmol/L的四氧嘧啶啶致糖尿病大鼠，经过4-6周，大部分（高于80％）出现尿微量白蛋白明显增多，病理检查表明，其肾脏出现明显病变。④在四氧嘧啶致小鼠糖尿病的基础上饲以高脂高糖饲料可以复制出高血糖、高甘油三酯、高尿酸的小鼠“三高”模型，该模型符合中医临床糖尿病痰湿证特性。⑤SD大鼠经特定高糖高脂饲料饲养，同时喂饲适量甲状腺素片一个月，再尾静脉注射四氧嘧啶35mg/kg，可以获得中医糖尿病阴虚血瘀证大鼠模型。 结论：①以生理盐水配制的60mg/kg的四氧嘧啶给禁食6-12小时的ICR小鼠尾静脉注射，能获得成模率高稳定性好的糖尿病小鼠模型，该模型适合于需要较长时间给药才能体现药效的中药的药效观察与评价，是降糖药物进行整体动物试验和药效评价筛选的首选模型平台。②给禁食6-12小时的SD大鼠尾静脉注射生理盐水配制的40mg/kg四氧嘧啶，能获得成模率高稳定性好的糖尿病大鼠模型，该模型适合较长时间给药的中药药效观察，适合用血量较多生化指标的连续动态观察，适合需要收集尿液进行相关指标检测的实验研究，适合糖尿病慢性并发症的病理、药理研究。③四氧嘧啶啶致糖尿病SD大鼠，经过4-6周，其肾脏出现明显病变。该型大鼠其尿白蛋白、尿蛋白、IgG明显升高，肾脏肿大等，同时伴有肾脏病理和TGF-β1等指标的病理变化。适用于抗糖尿病肾病药物的药效观察与糖尿病肾病形成机制研究。④在四氧嘧啶致小鼠糖尿病的基础上，饲以高脂高糖饲料复制出的小鼠糖尿病痰湿证模型，是筛选评价降糖降脂中药，尤其是中药复方、降糖降脂降尿酸多功效药方的新模型，对中医糖尿病的辨证论治具有一定的研究参考价值。⑤SD大鼠经特定高糖高脂饲料和甲状腺素喂饲，再尾静脉注射四氧嘧啶35mg/kg，可以获得糖尿病阴虚血瘀证模型。该型大鼠适用于降糖药物的药效观察、机理研究与中医证型研究以及防治糖尿病及其并发症保健食品的功效观察。
NETL