摘要
土萆薢来源于百合科肖菝葜属肖菝葜(Heterosmilax japonica Kunth.)的干燥根茎,为两广地区习用药材,俗称土太、川太。土萆薢具有清热解毒、泄浊祛湿以及通利关节等功效,主治湿毒蕴结、梅毒淋浊、筋骨挛痛,是两广地区使用的去湿茶中的主要原料。土萆薢的近缘种药材包括土茯苓和菝葜,土茯苓来源于百合科菝葜属光叶菝葜(Smilax glabra Roxb.)的干燥根茎,菝葜则来源于百合科菝葜属植物菝葜(Smilax china L.)的干燥根茎。迄今为止,对土茯苓和菝葜已经进行了较深入的研究,而土萆薢作为地方习用药材,研究较少,药用价值需要更多的挖掘,因此土萆薢具有很高的研究价值。同时由于土萆薢、土茯苓和菝葜三者容易混淆,在比较鉴别方面也有现实意义。土萆薢与土茯苓性状相似,在某些地区习称土茯苓,容易引起混淆。亦有人用较易获得的菝葜混充二者。在上述情况下,土萆薢的化学成分研究尤为重要,同时,三者缺少专属性较强的针对有效成分或指标成分的比较鉴别,也很难解决药材采购生产中的实际问题。因此,本课题首先对土萆薢的正丁醇部位进行了化学成分研究,并应用UV法、TLC法、HPLC法和DNA条形码等方法来比较鉴别土萆薢、土茯苓和菝葜三者之间的差异。 本研究主要内容包括:⑴土萆薢的正丁醇部位经过分离得到四个化合物,分别是:(R)-4-(2,4-二羟基-3,3-二甲基丁酰胺基)丁酸甲酯、3S-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸、乙基-β-D-木二糖苷、胡萝卜苷,其中(R)-4-甲基-(2,4-二羟基-3,3-二甲基丁酰胺基)丁酸甲酯是一个新的化合物,3S-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸和乙基-β-D-木二糖苷是首次从该植物中分离得到。⑵使用UV法测定了三种药材的总黄酮和总皂苷的含量。土茯苓的总黄酮平均含量最高,为54.57 mg/g;菝葜总黄酮平均含量次之,为30.52mg/g;土萆薢总黄酮平均含量最低,仅为3.75mg/g。菝葜的总皂苷平均含量最高,为1.97mg/g;土茯苓总皂苷平均含量次之,为1.00mg/g;土萆薢总皂苷平均含量最低,仅为0.54mg/g。同时建立了三种药材中落新妇苷和白藜芦醇的薄层色谱鉴别方法,土茯苓可检测出落新妇苷,土萆薢和菝葜均不能检测出落新妇苷;土茯苓和菝葜均可检测出白藜芦醇,土萆薢不能检测出白藜芦醇。通过HPLC法测定三种药材中落新妇苷和白藜芦醇的含量,其中土茯苓中落新妇苷和白藜芦醇的平均含量分别为13.28mg/g和0.17mg/g,菝葜中落新妇苷和白藜芦醇的平均含量分别为1.62mg/g和0.64 mg/g,土萆薢未检出落新妇苷和白藜芦醇。根据上述方法,可有效地区分土萆薢、土茯苓和菝葜三种药材。⑶应用DNA分子生物技术,建立了可以有效区分土萆薢、土茯苓和菝葜三种药材的ITS2序列DNA条形码,NJ树显示三种药材可从分子水平上得以区分,开拓了三种药材新的鉴别思路,为解决实际采购、生产和使用中对三者的真伪鉴别提供了方法。