摘要
大豆是世界上重要的经济作物之一，它也是植物蛋白和食用油的主要来源。根瘤菌与豆科植物之间经过长期进化形成了独特的共生固氮体系，其固氮量占生物固氮固氮量的比重很大。我国是大豆和根瘤菌的发源地之一，从土壤中分离出具有地域性特点的根瘤菌与当地大豆资源接种筛选结瘤能力强的组合，这不仅可以缓解农业对工业氮肥的依赖，并为根瘤菌与大豆共生固氮体系的研究奠定了理论基础。 本实验利用实验室已经分离的根瘤菌HD001对141份大豆核心种质资源材料进行结瘤能力鉴定，同时针对5份来自全国不同地域的土样，利用绥农14为捕获宿主进行根瘤菌的分离纯化，得到具有根瘤菌菌落形态特性的菌株。对其进行表型验证、分子验证，最后确定分离的菌株是慢生型根瘤菌。同时在5个不同地方分离获得的根瘤菌在不同资源上的结瘤能力也各有差别，可以作为进一步大田试验的候选菌株。所得结果如下: 1.对141份大豆资源进行了结瘤能力鉴定，获得141份大豆种质资源的结瘤能力指标。结瘤能力差别明显，根瘤数目范围为0-37。不同大豆种质资源的结瘤能力可以作为大豆结瘤能力深入研究的基础。 2.以黑龙江省主栽大豆品种绥农14为捕获宿主，在国内5个地区的土壤中分离根瘤菌。在酵母汁甘露醇(YMA)刚果红固体培养基上稀释划线方法共分离纯化得到110株菌株。分离的菌株通过革兰氏染色发现，其中8株菌株是革兰氏阴性菌。对这些菌株进行细菌培养性状检测发现，8株菌株在酵母汁甘露醇(YMA)刚果红固体培养基培养5天后有单克隆菌落出现，菌落形态为透明或半透明，白色或乳白色，低凸，边缘光滑，椭圆形，直径大小不一。16S rDNA基因序列分析结果表明:扩增分离菌株的16S rDNA基因序列与NCBI上已知序列比对分析后，判定5株菌株保守序列16S rDNA与慢生根瘤菌（Bradyrhizobium japonicum）相似度为98％，综上所述，5株菌株都是慢生型根瘤菌（Bradyrhizobium japonicum）。将分离得到的根瘤菌48进一步回接部分种质资源后，获得了根瘤菌在不同大豆种质资源上的结瘤特性，可以做为进一步大田生产试验的候选菌株。
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