摘要
灰霉病是目前蔬菜和水果生产上的主要病害之一。随着生活水平的不断提高，人们对于安全健康饮食的意识也逐渐增强，对农产品的要求越来越高。而化学农药的抗药性及造成的农残问题日益严重，因此开发出对灰霉病有拮抗作用的生防菌剂具有重要意义。本研究的目的是筛选对灰霉菌具有拮抗作用的木霉菌，对其进行菌种鉴定、固体发酵制成可湿性粉剂，并研究该菌剂在田间的应用效果及机理探索。研究的结果如下： 从实验室保存的11株木霉菌菌株中筛选出了对灰霉病效果较好的HD0311。结合形态学和分子生物学鉴定方法，鉴定为棘孢木霉（Trichoderma.asperellum）。 确定了菌株HD0311的固体发酵培养基为麦麸，中试规模发酵最佳条件为：菌种在PD培养基中发酵48h接种，5%接种量，初始pH值调整为5.5，物料湿度60%，空气湿度80%，静态透气盘发酵，铺盘厚度2cm，28℃下发酵72h达到最大产孢量，可达5.14x109 CFU/g。 不同的助剂对菌株HD0311存活率的影响显著不同，制备HD0311可湿性粉剂的最佳载体为白炭黑，分散湿润剂为羧甲基纤维素钠（CMC），稳定剂为六偏磷酸钠，保护剂为腐殖酸。优化配方为：6%羧甲基纤维素钠（CMC）、0.2%六偏磷酸钠、1.5%腐殖酸、5%木霉菌原粉、87.3%白炭黑。 对木霉菌可湿性粉剂进行质量检测后可得，本可湿性粉剂符合国家标准；防治灰霉病田间小区试验结果表明，木霉菌DLY303可湿性粉剂对茄子灰霉病防治效果达到79.39%，对辣椒灰霉病达到59.77%，对草莓灰霉病有73.18%的防治效果。 在草莓苗期施用木霉菌可湿性粉剂后21d采取根际土进行土壤微生物测序，用以分析研究土壤微生物多样性变化。结果表明，木霉菌对细菌的影响主要表现为假单胞菌属（Pseudomonas.spp）丰度明显增高；对真菌的影响主要表现为头梗霉属（Cephaliophora.spp）、赤霉菌属（Gibberella.spp）和毛壳菌属（Chaetomium.spp）丰度降低，四枝孢属（Tetracladium.spp）丰度显著增高。总体对土壤细菌多样性影响较小，对真菌多样性影响较大，会使真菌多样性指数明显降低。
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