摘要
本研究主要利用近红外光谱技术、HPLC色谱指纹图谱技术以及药理学试验对河南产连翘饮片的质量进行分析研究,主要包括以下四部分研究内容: 第一部分为河南产连翘饮片产地加工方法的优化。本实验以连翘苷、连翘酯苷A为综合评价指标比较了生晒、蒸晒、煮晒三种产地加工方法。结果表明,生晒品连翘中主要质控指标连翘苷、连翘酯苷 A含量均较低。同时,优化了蒸晒品与煮晒品的产地加工工艺。最终表明,最佳蒸晒品的产地加工方法为蒸制25min;最佳煮晒品的产地加工方法为5.6倍水,煮制14min;并且,考虑到饮片加工企业大批量生产过程中常采用烘干法干燥饮片,因此,考察不同烘干温度对连翘饮片指标性成分含量的影响,结合实际情况,最终确定连翘饮片的最佳烘干温度为80℃。 第二部分为近红外光谱技术在河南产连翘饮片质量分析中的应用。运用近红外光谱技术建立了连翘饮片的定性及定量分析模型,模型验证结果良好。定性方面运用判别分析方法建立了连翘饮片的定性分析模型,所建模型可以明确的将不同加工方法的连翘饮片鉴别开来,模型分析结果准确,误判率为0。定量方面运用偏最小二乘法(PLS)建立了不同连翘饮片中连翘苷、连翘酯苷 A的定量校正模型,连翘苷、连翘酯苷 A的定量校正模型内部交叉验证决定系数(R2)分别为0.94825、0.99489,内部交叉验证均方差(RMSECV)分别为0.02152、0.26895,校正均方差(RMSEC)分别为0.00991、0.182,预测校正均方差(RMSEP)分别为0.00750、0.0898,性能指数(PI)分别为97.0、96.4,所建模型能准确预测样品含量。近红外光谱法快速简便,无污染,易于实现在线检测,结果准确可靠,可用于连翘饮片的质量分析研究,并适合推广到更多的中药材质量分析研究中去。 第三部分为连翘饮片的HPLC指纹图谱研究。首先,建立了不同连翘饮片的HPLC指纹图谱,并利用“中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2004A版)”计算不同连翘饮片样品与共有模式的相似度。结果不同连翘饮片化学成分相似,但含量差别较大。生晒品连翘相似度相对较低,蒸晒品与煮晒品相似度较高,三种加工方法的连翘饮片相似度均大于0.9。其次,建立了不同连翘饮片不同萃取部位的HPLC指纹图谱,并采用相似度评价系统软件进行数据分析,结果表明,连翘饮片相同萃取部位指纹图谱相似度较高,不同萃取部位之间化学成分有明显差异。该实验方法准确、可靠、重复性高,所建指纹图谱可以全面反映连翘饮片的化学成分特征。 第四部分为不同萃取部位连翘提取物的抗大肠杆菌谱-效关系研究。采用大肠杆菌为实验菌种,比较不同萃取部位连翘提取物的抑菌作用,并结合不同萃取部位特征图谱与抗菌作用,采用主成分分析、双变量相关分析两种统计学方法推测其主要色谱峰表征的化学成分可能为连翘抗菌活性的有效成分。