摘要
白果（ginkgo seed）是银杏的干燥成熟种子，又名鸭脚掌、灵眼等，成熟时为黄色核果状，形似椭圆或近球，是我国卫生部规定的药食两用资源。白果在我国历代本草中均有记载，最早记载于元代《日用本草》，后在明代李时珍的《本草纲目》中记载有“熟食温肺益气，定咳喘，缩小便，止白浊；生食降痰，消毒杀虫”。2015年版《中国药典》中记载“白果性味甘苦涩，归肺经，具有敛肺止咳，止带缩尿之功效”。现代研究也表明白果中含有多种活性成分，具有抗氧化、抗菌、抗肿瘤、提高免疫力以及治疗心血管疾病的作用。 但也有本草记载“白果多食令人胪胀”，众多文献也记载了白果中毒事件。有文献报道白果中含有毒性物质4’-O-甲基吡哆醇（MPN），过量食用可致死，尤其是老人和儿童。对于该毒性物质的减毒方法鲜有报道，因此本文探索性的研究了MPN的减毒方法，同时，白果具有调节病理性亢奋及过敏的药理活性，推测白果可能具有干预阿尔兹海默病的作用，故对这一推测进行了试验研究。主要研究内容如下： （1）生白果中毒/效成分含量研究。MPN（胚乳125.8μg/g；胚芽141.3μg/g）；银杏酚酸（胚乳120.8μg/g；胚芽11.2 mg/g）；氰化物（未检测到）；银杏萜内酯（胚乳1.46 mg/g；胚芽18.32 mg/g）；腺苷（胚乳457.2μg/g；胚芽338.2μg/g）；GABA（胚乳1.57 mg/g；胚芽0.503 mg/g）；总黄酮（胚乳3.62 mg/g；胚芽17.63 mg/g）。 （2）不同方式炮制白果后与生白果相比毒/效成分变化的研究。实验结果表明，与生白果相比，炒制、煮制和微波炮制均能使白果毒性成分银杏酚酸减少，并能将白果中 MPN转化为毒性相对更小的 MPN-5’-G，达到减毒的目的，但微波炮制能极大地保留有效成分，所以微波炮制是较好的炮制工艺。 （3）微生物发酵白果对其中的MPN含量的影响。首先使用8株食品加工用的安全霉菌分别发酵白果，实验结果显示这8株霉菌不能代谢白果中的MPN，但其中5株菌发酵后 MPN的含量反而升高。生白果和熟白果分别经黑曲霉AS3.350粗酶液CEM和β-葡萄糖苷酶处理后，MPN含量均大幅度升高。研究结果表明粗酶液中的β-葡萄糖苷酶、磷酸酶及其他酶能将白果中的MPN类似物生物转化为MPN，同时首次发现并鉴别出白果中存在MPN-5’-P，含量约为20μg/g。 （4）化学法处理白果对其中的MPN含量的影响。调节MPN标准溶液的酸碱度并放置48 h，结果表明在酸性环境中 MPN较稳定，但 pH10碱性环境下MPN的降解率达到45.1%；40 W紫外光照射MPN标准溶液48 h，实验结果显示MPN的降解率达到33.3%；将碱与40 W紫外光照联合应用于MPN标准溶液，放置24 h，MPN的降解率达到了93.6%，但将白果提取液调到碱性条件并用40W紫外光照射，其中的MPN只有少量的降解；阳离子交换树脂D001对MPN的吸附率能达到98.5%。 （5）白果对APP/PS1小鼠的学习记忆能力的影响。首先，用APP/PS1转基因APP/PS1小鼠作父本，野生型C57/B6作母本繁育子代小鼠，再通过基因鉴定筛选出阳性APP/PS1小鼠与阴性正常小鼠。再将4月龄APP/PS1小鼠分别给药生白果和微波炮制白果长达8个月，进行行为学评价，实验结果表明微波后的白果能显著改善AD小鼠的学习记忆能力。 （6）白果干预AD的可能机制研究。小鼠行为学实验结束以后，对小鼠脑组织及血清中抗氧化指标和能量代谢指标进行测定及观察小鼠海马 CA1神经细胞形态。实验结果表明微波炮制白果能提高机体的抗氧化能力，激活神经细胞能量代谢水平，抑制神经细胞凋亡与退化，具有神经保护作用。
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