摘要
本试验以柱状苹果‘润太一号’为试材，研究了苹果茎段培养及试管苗叶片再生体系的建立，探讨了不同遮光处理、不同消毒时间处理、不同茎段长度处理和不同外源添加物处理对外植体污染率、褐化率和萌芽率的影响，并用无菌材料长出的叶片进行不同激素浓度的不定芽诱导。同时以苹果砧木M9-T337组培苗为试材，研究了不同激素浓度和培养基对组培苗壮苗和生根的影响，主要研究结果如下: 1、不同遮光时间处理对‘润太一号’无菌材料建立的结果显示，随着遮光处理时间的增加，外植体材料的污染率和褐化率有所降低，但外植体的生长势变弱，本试验以选取遮光7d的材料为宜，其污染率为23.33％，褐化率为25％，萌芽率达到了51.67％;不同腋芽个数处理中发现，污染率随着腋芽个数的增加而升高，褐化率之间差异不显著，以具有2个腋芽的材料萌芽率最高，达到了50％;不同消毒时间处理中，污染率随着消毒时间的增加而降低，褐化率随着消毒时间的增加而增加，最佳的消毒时间为8min，污染率为33.33％，褐化率为23.33％，萌芽率为5333％;不同外源添加物的处理中发现，各处理间的污染率差异不显著，以培养基中加入100mg·L-1Cef褐化率最低，最佳的外源添加物培养基为MS+100mg·L-1Cef;不定芽的诱导时发现，随着诱导天数的增加，不定芽诱导率也有所增加，以诱导50d效果较好，最适宜的不定芽诱导为MS+4.0mg·L-16-BA+0.5mg·L-1NAA。 2、不同激素浓度对M9-T337增殖和壮苗的结果表明，当6-BA浓度为1.0mg·L-1和2.0mg·L-1时，不论增殖芽数量的多少，有效的增殖芽数量都较多，当6-BA浓度为3.0mg·L-1和4.0mg·L-1时，有效增殖芽数量较少，且增殖芽部分叶片边缘焦黄现象，最佳的增殖培养基为MS+2.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA+0.3mg·L-1GA3，增殖系数为3.93，不同浓度激素壮苗培养基筛选处理中表明NAA对壮苗效果有较大的影响，当NAA浓度为0.5mg·L-1时，组培苗长势比较旺盛，有少量或没有黄叶，并伴随侧枝的出现，当NAA浓度为1.0mg·L-1或不添加任何激素的培养基中时，组培苗长势较弱，有较多的黄叶，没有侧枝的出现，试验结果表明最佳壮苗培养基为MS+1.8mg·L-16-BA+0.5mg·L-1NAA。 3、不同激素调控M9-T337生根的研究结果表明，把1.5cm以上的组培苗接种到1/2MS含有不同浓度的IBA中发现，最佳的生根培养基为1/2MS+0.3mg·L-1IBA，总生根条数为117条，平均生根条数为13条，根的形态表现为细长且无侧根;把无根苗接种在1/2MS含有不同IBA浓度的培养基中暗培养一周后，接种到不含激素的MS培养基中，结果表明最佳生根培养基为MS+0.6mg·L-1IBA总生根条数为102条，平均生根条数为11.33条，根的形态表现为短粗且有较多侧根;把无根苗接种在1/2MS+0.3mg·L-1IBA暗培养一周后，在1/2MS和MS培养基中添加0.3mg·L-1IBA和不添加IBA处理，结果表明，在添加IBA的培养基中，根系较短，在不添加IBA的培养基中根系较长，证明长期的IBA诱导抑制根系的长度。
NETL