摘要
Rab蛋白是Ras超家族中的主要成员，在哺乳动物细胞中已经发现超过七十种的Rab以及Rab-like蛋白。Rab蛋白通过结合GTP或GDP的构象转换来发挥其分子开关的作用，在调控细胞生长、迁移、侵袭、凋亡和细胞内蛋白质运输等方面起着非常关键的功能。Rab26定位于高尔基体和溶酶体，并且已有研究证明其在协调质膜蛋白运输中发挥着重要的作用。研究Rab26对乳腺癌细胞的影响，是研究Rab26蛋白的一个新的方向，对于深入研究Rab26的功能和作用机制有重要的意义。 本文通过检测不同乳腺癌细胞系中Rab26的蛋白表达情况发现，在高侵袭乳腺癌细胞中Rab26表达量较低，而在低侵袭乳腺癌细胞中Rab26的表达量较高。因此，猜测Rab26可能对乳腺癌细胞的迁移侵袭能力有抑制作用。之后通过划痕实验，Transwell穿膜实验等检测了Rab26对乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响。结果表明，在过表达Rab26WT和Rab26Q123L（GTP结合形式）的情况下，高侵袭乳腺癌细胞MDA-MB-231的迁移侵袭能力有所降低，而在过表达Rab26T77N（GDP结合形式）下迁移侵袭能力没有明显变化。进一步我们通过在低侵袭乳腺癌细胞MCF7中敲低Rab26，结果表明敲低Rab26之后MCF7的迁移侵袭能力有所增强。 为进一步探究其中的影响机制，本文通过免疫印迹等方法检测了一些迁移侵袭相关蛋白的表达情况。已有报道表明EGFR、MMP2、MMP9以及EMT相关Marker在恶性程度高的肿瘤细胞中扮演非常重要的角色。实验中检测过表达或敲低Rab26的情况下这些蛋白的变化，发现与对照相比，EGFR的表达量有所下降。之后还通过Large-scale GST-pulldown实验筛选出一些潜在的Rab26相互作用蛋白。以上研究工作，为深入研究Rab26的生物学功能和相关分子机制打下了基础。
NETL