NETL
基于四氟（五氟）苯酚酯连接臂制备蛋白质复合物及抗肿瘤糖疫苗的免疫活性研究
王建1
作者信息
摘要
本论文分为两个部分:第一部分涉及用活泼酯的方法制备蛋白质偶联复合物;第二部分研究抗肿瘤糖疫苗的抗体免疫反应。探讨NKT细胞激动剂和肿瘤糖抗原之间的共价连接臂对于疫苗免疫活性的影响。 目前，在活泼酯连接法中，N-羟基琥珀酰亚胺酯连接臂有较高的反应性，但缺乏足够的稳定性，而对硝基苯酚连接臂有较高的稳定性，但反应性不足。如何平衡反应性与稳定性，使活泼酯达到较高的偶联效率是本论文研究的问题。本文系统研究了五种活泼酯（即N-羟基琥珀酰亚胺酯、苯硒酚酯、对硝基苯酚酯、四氟苯酚酯和五氟苯酚酯）和苯乙胺在三种不同pH值条件下的反应性。随后制备出相应的己二酸二酯连接臂，并将它们应用到功能分子与蛋白质的偶联反应中。结果表明:相对于N-羟基琥珀酰亚胺酯和对硝基苯酚酯，四氟苯酚酯、五氟苯酚酯和苯硒酚酯能够较好的平衡反应性与稳定性。采用四氟苯酚酯、五氟苯酚酯和苯硒酚酯的连接臂，能够使功能分子与蛋白质达到较高的偶联效率。 肿瘤癌细胞表面通常会过量表达一些肿瘤相关糖抗原，而糖抗原是非T细胞依赖性抗原，无法激活辅助T细胞，帮助B细胞实现从IgM到IgG的抗体类型转换。本课题组发现将肿瘤糖抗原和NKT细胞激动剂共价偶联，制备疫苗STn-αGalCer，该疫苗无需引入辅助T细胞表位肽，能迅速引发针对肿瘤糖抗原的高滴度的IgG抗体免疫反应。为了研究NKT细胞激动剂和肿瘤糖抗原之间共价连接臂对疫苗免疫活性的影响，本文比较了共价偶联疫苗(STn-αGalCer)和非共价偶联疫苗(STn-βGalCer/αGalCer)的抗体免疫反应。结果表明:STn-βGalCer/αGalCer可以引发和STn-αGalCer相似的针对STn的IgG抗体滴度。
关键词
己二酸二四氟苯酚酯/己二酸二五氟苯酚酯/蛋白质修饰/抗肿瘤糖疫苗/NKT细胞/α-半乳糖神经酰胺/免疫活性引用本文复制引用
授予学位
硕士学科专业
有机化学导师
刘政；郭军学位年度
2018学位授予单位
华中师范大学语种
中文中图分类号
R3