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武汉某医院犬猫真菌性皮肤病病例统计分析及病原分离鉴定

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犬猫皮肤癣菌病作为小动物临床常见皮肤病之一,其不仅影响犬猫的外观,而且可导致犬猫的瘙痒,严重时可引起疼痛,并显著增加犬猫饲主感染皮肤癣菌的几率,严重危害着动物及人类的健康。武汉位于华中地区,由于降雨量充沛,常年处于高温高湿天气,且经济较为发达,饲养宠物的人数众多,但目前本地区没有关于犬猫皮肤癣菌病致病菌株的基因分型及耐药性研究的相关报道。本研究在为期一年(2016年1月至2016年12月)的时间内从临床中收集犬猫真菌性皮肤病病例,并就犬猫真菌性皮肤病在季节、气温、品种、性别、年龄、体重、发病部位等方面运用χ2检验和logistic回归进行统计学分析,同时从疑似患有皮肤癣菌病的犬猫机体上分离致病菌株,针对致病菌株的分离鉴定、基因型分析、耐药性等问题进行研究,并通过Kruskal-Wsllis秩和检验、S-N-K检验法以及Kappa法进行统计分析,以此来掌握犬猫皮肤癣菌病致病菌特性,从而为该病的后续深入研究及临床治疗提供必要的理论基础。 本研究主要内容包括:⑴从武汉动物医院及诊所收集犬真菌性皮肤病病例69例,调查发现几乎所有犬种都会患犬真菌性皮肤病,发病比例达3.18%,其中泰迪犬发病数最高;继发感染病例为53.62%,主要诱发因素有外寄生虫(虱子、跳蚤、疥螨、蠕形螨等)、细菌等;发病部位以脸部、前肢和后肢为主,发病比例依次为26.09%、21.47%和15.94%,不同部位发病数差异性显著(F2=28.870,p<0.001);而不同性别、体重、年龄的犬,其真菌性皮肤病的发病差异不显著,同时气温对犬真菌性皮肤病的发病影响不大,不同气温下犬真菌性皮肤病的发病差异不显著。⑵从武汉动物医院及诊所收集猫真菌性皮肤病病例14例,调查发现几乎所有品种的猫都会患真菌性皮肤病,发病比例为1.56%,其中英国短毛猫发病比例最高;单纯感染的真菌性皮肤病病例达92.86%。发病部位以脸部和四肢为主,发病比例分别为50.00%和35.72%;不同性别、体重、年龄的猫,其真菌性皮肤病的发病数差异不显著,且气温对猫真菌性皮肤病的发病影响不大,不同气温下猫真菌性皮肤病的发病数差异不显著(F2=1.437,p=0.488),3月至8月是猫真菌性皮肤病的高发季节。⑶自2016年1月至2016年12月,共从83例疑似犬猫皮肤癣菌感染病例中分离得到95株真菌菌株,其中皮肤癣菌菌株23例,非皮肤癣菌菌株72例。皮肤癣菌菌株中,主要为犬小孢子菌和须癣毛癣菌;非皮肤癣菌菌株中主要为曲霉菌、青霉菌以及其他菌株。⑷分别采用微量液基稀释法及纸片扩散法对分离得到的23株皮肤癣菌进行药敏试验。试验结果表明,伊曲康唑、特比萘芬、酮康唑、氟康唑四种抗真菌药物除氟康唑外其余三种药物均具有较好的抑菌效果,其中特比萘芬抑菌作用最为明显,其次为酮康唑、伊曲康唑。本次研究中未分离到耐药菌株。并且通过Kappa检验验证了两种药敏试验方法具有较为良好的一致性。⑸采用分子生物学RAPD方法,针对23株皮肤癣菌,应用寡聚核苷酸引物(GACA)4为单一引物进行PCR扩增,之后根据条带图谱的不同将同种菌株进行种内分型。结果显示,10株犬小孢子菌被分为4个基因型:A型,显示750bp和500bp左右的两条带;B型,显示500bp和250bp左右的两条带;C型,显示750bp左右的一条带;D型,显示750bp和250bp左右的两条带。而13株须癣毛癣菌则被分为3个基因型:A型,显示1100bp、900bp、740bp、400bp、300bp和250bp左右的六条带;B型,显示1100bp、900bp、740bp和400bp左右的四条带;C型,显示900bp、760bp、740bp、400bp和250bp左右的五条带。

张经纬

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犬猫真菌性皮肤病 菌株鉴定 基因测序 病原分离鉴定

硕士

兽医

胡长敏

2017

华中农业大学

中文

S8