摘要
红豆越橘是一种营养丰富的浆果，目前对红豆越橘的研究集中在对多酚的提取、分离纯化及性质分析等方面，有关红豆越橘三萜类的研究相对较少，而对高剪切乳化技术提取红豆越橘三萜、不同溶剂分别萃取红豆越橘三萜及部分性质测定等研究上未见报道。本文采用高剪切乳化技术从红豆越橘中提取三萜类化合物，不同溶解剂分别萃取三萜，采用X-5大孔树脂及Sephadex LH-20凝胶分离纯化三萜，研究纯化后红豆越橘三萜类化合物的抗炎效果。具体研究内容及实验结果如下: (1)红豆越橘三萜类化合物提取工艺结果为料液比1∶8、剪切温度60℃、提取时间120s、乙醇浓度95％。进一步研究红豆越橘不同溶剂萃取物组成及抗氧化相关性，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取，并评价乙醇粗提取物和不同溶剂萃取物中总酚、总黄酮、总花色苷、总三萜的含量，以及体外抗氧化能力(DPPH、ABTS自由基清除能力)，结果显示，红豆越橘粗提取物及不同溶剂萃取物均具有一定的抗氧化活性，其中乙酸乙酯、正丁醇萃取物的抗氧化活性较强，乙酸乙酯萃取物具有最好的DPPH自由基清除能力(IC50为0.27mg/mL)与ABTS自由基清除能力(IC50为0.05mg/mL)。不同溶剂萃取物的抗氧化活性与总黄酮和总酚的含量具有较强的相关性。 (2)红豆越橘三萜类物质的纯化工艺研究:以红豆越橘总三萜的静态吸附与解吸的效果为考察目标，比较7种大孔树脂的纯化效率，得出X-5树脂最适合红豆越橘总三萜的纯化，其吸附量为13.8mg/g，解吸率为80.8％，并且达到吸附平衡与解吸平衡的时间较短。上样质量浓度1.5mg/mL、样液pH6、上样体积2BV、上样流速1BV/h、80％的乙醇进行洗脱，红豆越橘总三萜的纯度由原来的5.13％提高到29.46％。经Sephadex LH-20纯化后纯度为43.2％±0.31。 (3)红豆越橘三萜类纯化物抗炎活性体外研究，结果显示，经Sephadex LH-20分离纯化，80％洗脱组分对透明质酸酶和牛血清白蛋白变性抑制率分别可达81.5％±1.37、72.59％±1.84。RAW264.7细胞在LPS的刺激下，LPS模型组细胞培养液中的IL-6、IL-10、TNF-α、NO含量提高;加入终质量浓度为0.1mg/mL的红豆越橘三萜类化合物后，IL-6、TNF-α、NO的分泌水平显著降低，终质量浓度为0.05mg/mL时，IL-10的分泌水平明显提升。
NETL