摘要
放线菌(actinomycetes)已成为新型抗生素的最大来源之一,其中包括最重要的抗菌药物类别,如β-内酰胺类,大环内酯类,四环素类,氨基糖苷类,利福霉素类和糖肽类。目前大部分使用的抗生素类药物是在几十年前发现的。然而所有类别的抗生素都出现了耐药性这一问题,由于病原体对结构相似或性质相同的抗生素具有快速的交叉耐药性,影响了抗生素的使用,因此迫切需要发现新型生物活性化合物。研究者们将研究的方向转向未开发生境的新放线菌,以期从中分离出新的功能性天然活性物质。本研究选用植物与微生物发生相互作用最频繁的根际土壤作为放线菌的分离源,对发现的稀有菌属(长孢菌属Longispora)的新种放线菌进行多方面的鉴定,并研究其代谢产物的组成,以丰富放线菌资源及长孢菌种的代谢产物多样性,结果如下: (1)选用五种分离培养基(HV、GS、CPA、DPA、SSA)对欧荨麻根际土中的放线菌进行分离,共得到112株放线菌。其中优势菌为链霉菌属(Streptomyces),也存在着小单孢菌属(Micromonospora)、诺卡氏菌属(Nocardia)、红球菌属(Rhodococcus)、野野村菌属(Nonomuraea)、马杜拉放线菌属(Actinomadura)和长孢菌属(Longispora)。 (2)对112株放线菌进行12种真菌、3种细菌的生长抑制实验。结果显示大部分表现出抑菌活性的放线菌属于链霉菌属,有33.9%的放线菌对至少3种病原真菌有抑制活性,33%的放线菌至少对1种指示细菌有抑制活性。对抑制真菌范围较广或对细菌抑制效果较好的22株活性放线菌进行聚酮化合物合成酶(PKS)基因和非核糖体多肽合成酶(NRPS)基因的检测,发现有20株含有至少1种生物合成基因,说明这些活性放线菌具有产生天然活性物质的潜能。 (3)对两株放线菌NEAU-PCY-3T和NEAU-PCY-4进行多相分类学鉴定。通过分子水平的检测大致确定其系统进化上最接近的菌属为长孢菌属,再进行宏观及微观形态特征、不同培养基上的生长颜色和状态、生理生化特征及细胞成分化学特征的比较分析,确定这两株放线菌代表着长孢菌属的一个新种,并以它们的分离源(Urtica urens L.)命名为Longispora urticae。 (4)对稀有放线菌NEAU-PCY-3T进行代谢产物的分离鉴定,得到六种化合物2-苯乙酰胺、反式肉桂酸、吲哚-3-甲醛、邻氨基苯甲酸、3-hydroxyacetyl-indole和肉桂酰胺。