摘要
目的:探讨基于AIE材料分选外周血循环肿瘤细胞的新方法,研究从术前静脉采集血液与术中回收血液两种不同取样方式使用AIE材料提取CTCs的价值,明确肝细胞肝癌患者预后与所检测的CTCs数量之间的关系。 方法:使用体外细胞掺杂实验模拟外周血CTCs,检验使用AIE材料检测CTCs的灵敏性及其检测阈值。通过荷瘤小鼠全血采集检测该方法筛选CTCs的特异性和稳定性,并且借助小动物活体成像技术检测肿瘤线粒体靶向AIE材料在荷瘤小鼠的体内分布差异,验证其肿瘤靶向性成像效果。将符合要求就诊于武汉协和医院肝胆外科行肝叶切除术的患者纳入研究对象。实验分别以肝细胞肝癌和肝海绵状血管瘤患者作为实验组和对照组。所有患者术前均依据影像学诊断和血清肿瘤标志物谱明确诊断,且术后所有肝切除标本均经组织病理学确诊。取部分切除肿瘤标本用于原代细胞提取及阳性细胞对照,将每名肝切除患者术前静脉血及术中吸引器收集的约100mL血液用于CTCs检测和分离。 结果:体外细胞掺杂实验证实AIE材料检测方法检测CTCs的最小阈值为50-100个肿瘤细胞/100mL全血。通过小动物活体成像技术发现线粒体靶向AIE材料在荷瘤小鼠在成瘤部位有着较高的分布差异,具有良好的肿瘤靶向性成像效果。肝细胞肝癌患者每100mL血液可分离756.2±273.8个高线粒体膜电位(HMMP,Highmitochondrial membrane potential)细胞,其数量明显高于对照组检测出的78±16.5个HMMP细胞/100mL。经免疫荧光及镜下核质比等对比观察证实所检测出的约85.7%的HMMP细胞可认定为CTCs,同时当HMMP细胞检测数高于756.2个细胞/100mL这一阈值的患者比低于此阈值的患者预后较差。 结论:这种基于AIE材料检测CTCs的新方法比现有的方法更加可靠和敏感,可用于评估肝癌患者的预后。