摘要
本文主要从以下几个部分展开论述: 第一部分 EBV在鼻咽癌细胞血管生成中的作用 鼻咽癌是中国南方及东南亚地区最常见的头颈部癌症之一。其发生具有明显的种族和地域分布不均的特点，并且与EBV感染密切相关。大多数的鼻咽癌病人被确诊时，已经处于晚期阶段（Ⅲ期和Ⅲ期），因而有效的治疗对于提高病人的生存非常重要。目前治疗鼻咽癌主要采用放射治疗的手段，同时依据其肿瘤组织具有高度血管化的特征，抗血管疗法也被应用于鼻咽癌的治疗中，并取得了良好的效果。抗增殖及抗血管药物西妥昔单抗已经获得FDA认证，并且用于治疗晚期的鼻咽癌。然而并不是所有的病人都能从这种治疗中获益，有很多病人会对治疗产生抗性。因此深入研究鼻咽癌血管生成的机制以开发更有效的针对鼻咽癌的抗血管药物显得十分必要。 EBV是鼻咽癌的一个关键的致病因子，其编码的一些蛋白如LMP1和EBNA1具有很强的致癌特性，诱导肿瘤的血管生成，促进鼻咽癌的发展。研究EBV在血管生成中的调控网络有助于认识鼻咽癌血管生成的机制以及病毒感染对于肿瘤进程的影响。 在本研究中，利用体外EBV感染的鼻咽癌细胞模型，首先证实EBV感染促进血管生成及肿瘤生长。通过在EBV感染细胞中用CRISPR/Cas9技术干扰EBV的复制循环，进一步验证了EBV对于血管生成及肿瘤生长的作用。随后，利用蛋白组学分析发现EBV能促进很多重要的促血管因子的分泌。从中挑选了CCL5进行功能验证，得出CCL5是EBV诱导血管生成的关键调控因子。为了进一步说明CCL5对于血管生成的调控机制，对EBV感染细胞进行了转录组学分析，得出EBV感染激活了PI3K/AKT信号通路。之后验证了这一分析，并且发现HIF-1α通路也是被EBV激活。随后证明CCL5通过调节PI3K/AKT通路和HIF-1α通路促进血管生成。最后，在人鼻咽癌组织样本中验证了CCL5与血管生成的关联性。 综上所述，我们的研究表明EBV通过诱导CCL5的表达，激活PI3K/AKT通路和HIF-1α通路，增强了鼻咽癌血管生成。 第二部分 EBV在鼻咽癌细胞血管拟态中的作用 肿瘤的发展需要大量的血液供应，以维持快速的生长与转移。大量的研究已经集中于肿瘤血管生成的研究，即肿瘤微环境中由内皮细胞迁移并在肿瘤组织中及周围形成血管，这是传统的成血管的范畴。然而，近年来的研究表明，肿瘤获得血液循环的方式，不只是通过诱导血管内皮细胞形成血管，以供应自身;肿瘤组织内部也会形成管腔结构，这种管腔结构由PAS染色阳性的基底膜围成，也能介导血液的循环，被称为血管拟态，是肿瘤供应自身生长的另一种方式，不依赖于微环境中的血管生成。 血管拟态在黑色素瘤、前列腺癌以及肝细胞瘤等肿瘤中，均有研究，其对肿瘤的发展具有重要作用。在鼻咽癌中，关于血管拟态的研究较少。同时鼻咽癌是EBV高度相关的肿瘤，在以前的研究中，我们已经表明EBV会促进鼻咽癌的血管生成。但EBV是否能调控鼻咽癌的血管拟态，尚不清楚。在本研究中，我们利用体外EBV感染的鼻咽癌细胞以及CRISPR/Cas9介导的EBV拷贝数的减少，证明EBV感染能促进鼻咽癌细胞血管拟态的形成，进而对肿瘤的发展有促进的作用。随后的研究表明EBV激活了HIF-1α转录因子，HIF-1α介导了EBV诱导的鼻咽癌细胞血管拟态的形成，并且PI3K/AKT通路通过调节HIF-1α，也参与到对EBV诱导的血管拟态的调控。 综上所述，EBV能够通过激活AKT/HIF-1α通路，诱导鼻咽癌血管拟态的形成，而促进肿瘤的发展。
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