摘要
三阴性乳腺癌（triple negative breast cancer,TNBC）是一种侵袭转移能力更强，预后更差的特殊类型乳腺癌。Fam20C是三阴性乳腺癌细胞迁移的关键因子。本文旨在考察Fam20C作为TNBC治疗的潜在靶点可行性和寻找Fam20C抑制剂作为抗TNBC的新途径。 通过从PrePPI蛋白相互作用数据库收集蛋白相互作用数据，构建Fam20C蛋白质相互作用网络，结合GO功能注释，从系统生物学角度研究Fam20C在TNBC中的作用机制。通过对TCGA和METABRIC两个癌症数据库的信息挖掘，考察不同亚型乳腺癌样本Fam20C的mRNA表达量是否存在显著差异。通过同源建模和蛋白质晶体叠合确定选择性抑制剂的设计结合位点，运用分子对接方法、MTT细胞毒活性实验和分子动力学模拟方法筛选Fam20C抑制剂。利用荧光显微镜观察、蛋白免疫印迹、流式细胞计数、划痕实验研究抑制剂抗肿瘤初步机制。 网络分析表明，Fam20C蛋白相互作用总网络包含672节点和974相互作用，结合GO功能注释初步阐明了Fam20C在癌症中的作用机制。转录分析表明，在TCGA数据库，Fam20C的mRNA表达量在TNBC样本组比Non-TNBC样本组更高（Wilcoxon秩和检验P=6.79E-16），与METABRIC数据库结果一致（Wilcoxon秩和检验P=2.77E-19）。MTT细胞毒活性试验得出FL-1607对MDA-MB-468细胞具有一定的抗肿瘤活性，并诱导细胞产生凋亡细胞形态学变化（染色质浓缩），流式细胞仪结果显示，细胞凋亡率随FL-1607给药剂量增加而增加，呈剂量依赖性。蛋白免疫印迹发现，FL-1607促进Bax、Cyto.C、Caspase3蛋白表达上调，并导致Bcl-2蛋白表达下调，表明药物可诱导细胞发生线粒体途径的细胞凋亡。划痕实验表明，与空白组相比，FL-1607处理组MDA-MB-468细胞划痕愈合程度更低。 综上，Fam20C是治疗三阴性乳腺癌的有效靶点，FL-1607可以诱导TNBC细胞系（MDA-MB-468）细胞凋亡和潜在抑制细胞迁移。
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