摘要
目的: 白杨素是一种天然黄酮化合物,具有抗肿瘤、抗氧化、降血脂等药理活性.然而,葡萄糖醛酸化代谢(UGT代谢)极大限制白杨素的口服吸收,严重影响其口服疗效的发挥.因此,抑制UGT代谢是提高白杨素口服生物利用度的有效途径,利于增强其口服疗效.本论文将筛选UGT抑制型辅料,制备包含UGT抑制型辅料的纳米乳,用于提高白杨素的口服生物利用度. 方法: 1.采用体外酶孵育体系,考察21种常用辅料对白杨素UGT代谢的调节作用,阐明UGT抑制型辅料对白杨素UGT代谢的抑制机制. 2.以HeLa1A1为细胞模型,测定5种UGT抑制型辅料(Brij35、Brij58、Labrasol、油酸钠和Tween20)对白杨素细胞水平UGT代谢的抑制效果. 3.采用超声乳化法制备白杨素纳米乳,基于油酸钠的纳米乳(SO-NE)作为UGT抑制型制剂,基于Tween80的纳米乳(T80-NE)作为参比制剂.对所制备纳米乳(SO-NE和T80-NE)的粒径、ζ电势、多分散系数(PDI)、形态、释放特征及包封率进行表征和测定.通过内吞抑制实验,阐明SO-NE及T80-NE的摄取机制. 4.将制备的白杨素制剂(混悬剂、SO-NE、T80-NE以及物理混合剂)经灌胃给予大鼠后,采用液质联用法测定血浆中白杨素及其UGT代谢物的浓度,计算药动学参数.评价UGT抑制型制剂(SO-NE)对白杨素药动学特性的影响. 结果: 1.在体外酶孵育体系中,5种辅料(Brij35、Brij58、Labrasol、油酸钠和Tween20)可明显抑制白杨素的UGT代谢,且抑制效果具有浓度依赖性.其中,油酸钠的抑制作用最显著(>80%),代谢抑制遵循混合型抑制机理. 2.在HeLa1A1细胞模型中,5种辅料(Brij35、Brij58、Labrasol、油酸钠和Tween20)对白杨素的UGT代谢有不同程度抑制作用.油酸钠对白杨素的代谢以及代谢物外排抑制最为明显. 3.SO-NE与T80-NE均为近球形结构,粒径分别为83.2nm和82.5nm,ζ电势分别为-43.7mV和-45.9mV,包封率分别为89.5%和90.3%.SO-NE与T80-NE的体外释药符合扩散与溶蚀混合型机制.两种制剂通过特异性网格蛋白及特异性小窝蛋白介导的内吞作用进入细胞. 4.UGT抑制型制剂(SO-NE)显著提高白杨素的口服生物利用度.与混悬剂组相比,SO-NE组的白杨素系统暴露量(AUC)和最大血药浓度(Cmax)分别提高了4.3倍和3.5倍.同时,SO-NE组显著抑制白杨素在体内的UGT代谢(抑制率为42.5%).T80-NE组和物理混合剂组对白杨素的药动学特性及体内UGT代谢无显著影响. 结论: 本研究成功制备了一种UGT抑制型纳米乳.该纳米乳可显著抑制白杨素在体内的UGT代谢,从而显著提高白杨素的口服生物利用度.本研究为研制黄酮类药物的高效口服给药系统提供了一种策略.
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