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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子分型和耐药性研究

白志敏

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子分型和耐药性研究

白志敏1
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作者信息

  • 1. 福建医科大学
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摘要

目的:研究泉州地区几家主要医院(福建医科大学附属第二医院,泉州市儿童医院,晋江市医院)临床分离的MRSA菌株PVL毒力因子分布情况,spa分型,MLST分型以及SCCmec分型并进行药物敏感性试验,以明确该地区MRSA的毒力因子,分子特征和耐药表型。 方法:对泉州市三家三级医院收集的65株MRSA临床分离株通过PCR方法扩增PVL基因片段,并通过琼脂糖凝胶电泳观察结果;通过PCR方法扩增金葡菌A蛋白(spa)X多态区,将目的基因片段进行测序从而获得多组24bp大小的重复序列,登录进行序列比对得出spa型别;通过多重PCR方法对65株MRSA临床株进行SCCmec分型;用PCR方法分别扩增金葡菌的7个管家基因并测序,通过MLST网站()进行序列比对得出序列类型型别,使用eBRUST软件生成克隆复合体(CC)分析各个型别之间的相关性;通过Vitek微生物分析系统测定MRSA对12种抗菌药物的药物敏感性,按照CLSI2017标准分析耐药情况。 结果:65株MRSA临床分离株中,PVL基因阳性为31株,阴性为34株,阳性率为47.7%。MRSA分子分型主要克隆类型:CC59-ST59/ST338克隆是本地区的主要克隆类型,共38株,占58.5%(38/65),其中CC59-ST59/ST338-spa t437-Ⅳ共28株,占43.1%(28/65),CC59-ST59/ST338-spa t437-Ⅲ6株,占9.2%(6/65),两型合计34株,占52.3%(34/65)。CC8-ST239-spa t030-Ⅲ/Ⅳ共6株,占9.2%(6/65)。CC5-ST5/ST965-spa t060/t062-Ⅳ共4株,占6.1%(4/65)。抗菌药物敏感性试验结果:青霉素耐药率为100%;替考拉林、利奈唑胺和万古霉素全部敏感未见耐药株;环丙沙星、复方新诺明、庆大霉素、左氧氟沙星、克林霉素、红霉素、利福平和四环素的耐药率分别为15.4%、12.3%、12.3%、13.9%、87.7%、86.2%、6.2%、36.9%。MRSA的多重耐药率为93.8%(61/65),耐药模式主要为DA/E模式和DA/E/TE模式,分别占46.2%(30/65),24.6%(16/65)。 结论:在泉州市的三家医院中,PVL毒力因子检出率较高,提示MRSA感染的高致病性风险;CA-MRSA和HA-MRSA的存在交叉感染,分子特征越来越模糊,具有典型的CA-MRSA分子特征(SCCmecIV型,V型和PVL阳性)的HA-MRSA已经成为医疗保健相关感染的重要原因;CC59-ST59/ST338-spa t437-Ⅳ(43.1%)是本地区的主要克隆型,其次是CC59-ST59/ST338-spa t437-Ⅲ和ST239-spa t030-Ⅳ/Ⅲ各占9.2%(6/65);MRSA多重耐药率高,耐药情况严重,未发现万古霉素、利奈唑胺和替考拉宁耐药株。

关键词

病原微生物/金黄色葡萄球菌/毒力因子/药物敏感性/耐药表型

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授予学位

硕士

学科专业

生物化学与分子生物学

导师

廖之君

学位年度

2018

学位授予单位

福建医科大学

语种

中文

中图分类号

R3
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