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竹肉球内生菌多肽的分离纯化以及抗农业致病菌活性研究

韩英乾

竹肉球内生菌多肽的分离纯化以及抗农业致病菌活性研究

韩英乾1
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作者信息

  • 1. 西北农林科技大学
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摘要

竹肉球内生菌又名戈茨肉球菌,是中国传统中药,仅在非洲和亚洲有所发现,在中国,主要分布在川东,藏北,云南西北部等海拔较高的地区。作为中国长期以来的民间传承的抗菌消炎药,近年来又在抗癌方面崭露头角,但对其化学成分进行的研究报道却很少,因此对其含有的生物活性物质的研究与开发,具有非常重要的意义。本论文通过盐析法对竹肉球内生菌进行浸提,离心,沉淀,最后通过冻干的方法得到竹肉球内生菌(Engleromyces goetzei P. Hennings)的粗提物,并进行对该粗提物的抑菌活性试验,结果表明该粗提物对农业致病真菌的菌丝生长均有不同程度的抑制作用。再经分子筛G-25凝胶柱纯化后得到的产物,经茚三酮和双缩脲定性反应证明该产物为粗多肽,采用滤纸片法和平板对峙法,以抑菌圈为指标进行抑菌活性检测,结果表明对农业致病真菌的菌丝生长均有不同程度的抑制作用,其中,对小麦赤霉病菌(Gibberella zeae),核果炭疽病菌(Drupe anthrax)和茄子黄萎病菌(Verticilllium albo-atrum)的抑菌活性最高,IC50分别为8.65μg/mL,9.48μg/mL和8.94μg/mL。并让抗菌肽在酸碱,高温,酶解和有机溶剂环境下对其稳定性进行研究,结果表明除了有一定的溶剂选择性和α -淀粉酶,胃蛋白酶对其有一定的水解性之外,该抗菌肽具有很强的稳定性。用HPLC对粗多肽进一步纯化,得到电泳纯的抗菌肽,并通过质谱认定该抗菌肽的分子量大概在5796.0 Da。以上研究,为进一步开发和研究竹肉球内生菌中新型的天然抗菌肽,打下了理论基础。

关键词

竹肉球内生菌/抗菌肽/分离纯化/抗农业致病菌活性

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授予学位

硕士

学科专业

化学生物学

导师

陶虎

学位年度

2018

学位授予单位

西北农林科技大学

语种

中文

中图分类号

R2
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