摘要
随着我国经济的飞速发展，山东省畜牧业进入了全新的发展时期。为了应对新时代发展要求，保障食品卫生安全，明确我省蛋鸡疫病流行动态以及病毒变异情况，因此本研究对山东省境内蛋鸡中主要流行的H9-AIV、NDV、IBV、ILTV、FAV感染进行系统地流行病学调查，并根据调查结果，掌握我省蛋鸡疫病最新动态，从而制定科学、可靠的防控措施，保证我省蛋鸡养殖业安全健康发展。 本研究根据H9-AIV的 HA 基因、NDV的 F基因、IBV的S1基因、ILTV的TK基因和FAV的hexon基因的全部或部分序列，设计合成 5对特异性引物，验证PCR与RT-PCR检测方法。并应用验证的方法对山东泰安、济宁、菏泽等地采集的671份蛋鸡样品进行检测，结果显示，样品中五种病原的阳性数为294份，阳性率为43.8%，其中H9-AIV、NDV、IBV、ILTV、FAV阳性率分别为36.4%、0.0%、10.0%、7.2%、3.0%。以上结果表明H9-AIV感染率最高，IBV、ILTV感染率较高，FAV感染率较低，未发现NDV感染。对所获得的检测结果进一步分析显示，样品中的混合感染以H9-AIV+IBV、H9-AIV+ILTV、H9-AIV+FAV 三种感染方式出现的。在 83 份混合感染样品中H9-AIV+ILTV感染数最高，占阳性样品的63%；H9-AIV+IBV感染数为33份，占阳性样品的40%；H9-AIV+FAV感染数最少为2份，占阳性样品的2%。 通过分析病原感染的日龄分布情况发现，育雏期H9-AIV阳性感染109份，育成期H9-AIV阳性样品46份，产蛋期H9-AIV阳性样品96份，可见H9-AIV可感染各个日龄蛋鸡，且以育雏期和产蛋期感染率最高；育雏期IBV阳性样品49份，育成期IBV阳性样品18份，产蛋期无IBV阳性样品，可见IBV感染主要发生在育雏期和育成期；ILTV仅在产蛋期样品中检测到48份阳性，表明，ILTV主要危害成年蛋鸡，育雏期和育成期的感染率很低；育雏期和育成期FAV阳性样品为10份，产蛋期FAV无阳性样品检出，可见FAV感染在蛋鸡育雏期和育成期多发。 通过分析病原感染的季节分布情况发现，H9-AIV、IBV、ILTV感染在春、夏、秋、冬均有发生，其H9-AIV不同季节阳性感染数量分别为87份、33份、71份、53份；IBV不同季节阳性感染数量分别为28份、4份、10份、25份；ILTV不同季节阳性感染数量分别为10份、4份、12份、22份；FAV感染主要集中夏、秋两季，阳性感染数量分别为 16 份和 4 份，春、冬两季无阳性感染；均未出现 NDV 阳性感染。可见 H9-AI、IB和ILT流行趋势大致相同，具有明显的季节性，春、秋、冬三个季节发病率相对较高，尤其是冬末春初和夏末秋初时期为发病高峰。FAV感染的发病规律则与H9-AI、IB、ILT相反，呈夏季发病率最高，而冬春季发病率最低。 利用LASERGENE物学软件对分离到的5株H9-AIV、4株IBV、4株ILTV、2株FAV与国内外参考毒株进行基因同源性和遗传进化分析。结果发现，我省H9-AIV分离株之间高度同源，与Y280毒株同源性较高并且位于同一分支，与G1、Y439分支较远；IBV分离株与参考株存在明显差异，与疫苗株H120、491、H52等同源性普遍较低，与QX、LX4参考株同源性较高，分离株全部位于QX基因型分支，属于QX基因型；ILTV分离株 TK毒力基因与 BeiJing E2 、Throne、632、216等参考株高度同源，表明ILTV TK 毒力基因高度保守，较为稳定，与美国 632 强毒株位于同一分支，与 MDV、HVT等其他禽类疱疹病毒亲缘关系较近，与哺乳动物疱疹病毒 HHV 等亲缘关系较远；FAV分离株之间的hexon基因同源性较高并且与FAV-4同源性最高，位于FAV-4分支内，为我省主要流行血清型。 综上所述，H9-AIV、NDV、IBV、ILTV、FAV 感染仍然是威胁我省蛋鸡养殖业发展的主要疫病。它们单一感染或共感染，造成鸡的发病、死亡或生产性能降低，给蛋鸡养殖业造成了巨大的经济损失。
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