摘要
玛咖（Lepidium meyenii）是十字花科独行菜属一年生或两年生的一种草本植物，原产于南美秘鲁安第斯山脉地区。目前国内外关于玛咖的研究主要集中在玛咖根上，而对玛咖叶的关注较少。多糖是由多个单糖单位通过糖苷键聚合而成的生物活性大分子，具有多种生理活性。本文以产自云南的玛咖叶为原料，经提取、分离纯化后成功制备了多糖活性组分，并对其结构进行初步分析；同时对玛咖叶多糖的抗氧化活性以及免疫调节活性进行了研究。主要研究结果如下： 1. 玛咖叶粉末经索式提取后晾干以及 95%乙醇浸泡处理后，热水浸提法提取玛咖叶多糖，脱蛋白处理后制备粗多糖（Crudelepidium meyeniileaves polysaccharides，CLMLP）。然后经DE-52纤维素离子交换层析柱初步分离纯化，得到DLMLP-1、DLMLP-2和DLMLP-3三种多糖纯化组分，选取总糖含量最高的组分DLMLP-3收集、浓缩、透析和冻干，然后经SephadexG-100葡聚糖凝胶柱进一步纯化后，制备多糖二级纯化组分LMLP。 2. 对LMLP的结构进行初步鉴定，SephadexG-100凝胶柱检测 LMLP的平均分子量为58.43KDa，气相色谱仪检测LMLP的单糖组成半乳糖：阿拉伯糖：鼠李糖：葡萄糖：甘露糖的摩尔比为5.506：4.046：1.149：0.765：0.012。比色法鉴定LMLP中糖醛酸含量为27.43%，结合单糖组成分析结果，其半乳糖含量为47.95%，阿拉伯糖为35.25%，鼠李糖、葡萄糖和甘露糖的含量均较低。紫外全波长扫描后验证其中不含蛋白质和核酸。红外光谱结果显示 LMLP 中含有伸缩振动的O-H、C-H键、C=O键和α-糖苷键等多糖特征吸收峰。通过高碘酸氧化以及 Smith 降解后气相色谱分析其中的糖苷键类型，结果表明 LMLP 中存在1-6位键合的糖基或非还原末端糖基，1-2，1-4，1-2,6，或1-4,6，1-3键等糖苷键类型。 3．LMLP体外DPPH清除能力和还原能力的测定。结果表明：当LMLP的浓度为1mg/mL时，其DPPH清除率为68.42%，LMLP的DPPH清除能力的半最大效应浓度（EC50）为3.72mg/mL。当LMLP浓度为1mg/mL时，700nm处的吸光度值为0.079。以巨噬细胞系为模型，体外验证了LMLP对RAW264.7细胞的免疫调控作用。结果表明：LMLP能够种剂量依赖的促进RAW264.7细胞增殖能力，相应提高其吞噬能力，促进NO和IL-10细胞因子的分泌，且能够增强细胞表面抗原CD80的表达。综上所述，LMLP具有体外抗氧化和免疫调节活性。 本文研究结果表明玛咖叶多糖纯化组分 LMLP 可以应用于新型功能食品的开发和利用，也为玛咖的综合利用奠定了基础。
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