乳酸菌是一类革兰氏阳性、无芽孢、厌氧或兼性厌氧的细菌。乳酸菌中的乳杆菌属包含50多个种,大多数具有调节肠道菌群、提高人体免疫力等功能,干酪乳杆菌、植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌等已被应用于乳制品等食品加工行业中。而开菲尔乳杆菌(Lactobacillus kefiri, L. kefiri)至今未列入国家可食用乳酸菌名单。因其具有免疫调节、抑制致病菌、降低血清胆固醇等作用,被广泛关注。本文以分离自波兰开菲尔粒的菌株为研究对象,对其功能性和发酵特性进行研究,以期为其开发利用提供理论依据。主要研究结论如下: (1)从波兰开菲尔粒中分离出一株菌,结合形态学鉴定、生化试验鉴定、分子生物学鉴定,证实该菌株为L. kefiri,命名为KL22。 通过抗生素敏感性试验,确定菌株KL22对环丙沙星、万古霉素、复方新诺明和苯唑西林表现出抗性,对四环素为中度敏感,对其余25种抗生素表现为敏感。 (2)菌株KL22具有较强耐酸性和一定的耐胆盐能力。通过疏水性试验、自凝聚力试验及Caco-2细胞粘附性试验,证明KL22具有较高的粘附能力,且菌液浓度为108 CFU/mL时,其粘附数显著高于其它浓度,为24.59 个/细胞。 另外,KL22对OH-、O2-和DPPH都具有清除能力,其中,灭活组对DPPH的清除能力高达72.02%;对IL-8、TNF-α和hBD-2具有一定的调控作用,间接可调节免疫系统,提高宿主免疫能力。体外降胆固醇试验结果表明,菌株KL22具有一定的降胆固醇能力,其中活菌状态的KL22作用48 h后的胆固醇降解率为52.94%。 (3)通过对菌株KL22的发酵特性研究,发现其有一定的自溶性和产酸能力,其最适发酵糖为麦芽糖,最适发酵温度为37℃;另外,还具有保质期内活菌数较高的特点。最后,选择5种基础发酵剂与菌株KL22共同发酵,结果表明,与基础发酵剂1共同发酵的酸乳,口感较好,pH、酸度、黏度、持水力等指标均较好。