摘要
为了明确桦褐孔菌发酵物（Inonotus obliquus fermentation products;IOFP）饲喂时间对鸡疫苗免疫效果的影响;优化和完善饲喂方案;降低生产成本;本研究对饲喂不同时间 IOFP 机体的体液和细胞免疫进行了测定;研究不同阶段添加饲喂来研究其对无特定病原（Specific Pathogen Free;SPF）鸡新城疫免疫效果的影响;为减少CpG ODN佐剂的用量;降低疫苗的生产成本;尝试在日粮中添加IOFP;以确定其对CpG ODN佐剂效应的增强效果。具体研究内容如下： （1）不同时间饲喂桦褐孔菌发酵物对SPF鸡新城疫免疫效果的影响 选用120只1日龄SPF鸡随机为6组：Ⅰ-Ⅳ组在试验期内分别全程饲喂（Ⅰ组）、免疫前饲喂7天（Ⅱ组）、免疫前后分别饲喂4天和3天（Ⅲ组）、每饲喂4天间隔3天（Ⅳ组）含0.8% IOFP的日粮;且均免疫NDV疫苗;Ⅴ组免疫NDV疫苗;饲喂商品化饲料;Ⅵ组为以PBS代替疫苗免疫;同时饲喂商品化饲料的空白对照组。所有动物于14日龄进行新城疫病毒（Newcastle disease virus; NDV）弱毒疫苗首免;21天后加强免疫。分别于首免后0天、7天、14天、21天、28天、35天和42天分离各组外周血血清;进行NDV HI抗体滴度和中和抗体滴度的测定;分离不同时间点外周血淋巴细胞进行增殖指数的测定和Th1型和Th2型细胞因子mRNA表达水平的检测。结果显示;在饲料中添加IOFP能够有效提升疫苗的免疫效果;而相比于其他各组;Ⅰ组和Ⅱ组的饲喂时间能够更为显著的提升机体的N DV HI抗体滴度和中和抗体滴度、PBMCs增殖水平和Th1型/Th2型细胞因子 mRNA的表达量。 （2）桦褐孔菌发酵物与CpG共同作用对SPF鸡新城疫免疫效果的影响 100只1日龄SPF鸡随机分为5组：设立CpG ODN、IOFP的单独和联合应用组（CV; V+IOFP and CV+IOFP groups）;以及不添加佐剂的疫苗组（V group）和对照组(PBS group);所有动物于14日龄进行新城疫病毒（Newcastle disease virus; NDV）灭活疫苗首免;21天后加强免疫。分别于首免后0天、7天、14天、21天、28天、35天和42天分离各组外周血血清;进行NDV HI 抗体滴度和中和抗体滴度的测定;同时分离淋巴细胞进行增殖指数的测定;随后分离各组首免后 0 天、21天和42天的外周血淋巴细胞和血清;对CD4+、CD8+T细胞的含量和IL-4、IFN-γ的表达量进行测定。结果显示;相比于两者的单独使用;CpG ODN和IOFP的联合应用并未表现出进一步增强机体HI 抗体滴度、淋巴细胞增殖指数、C D4+/C D8+T细胞总量和Th1/Th2细胞因子表达量的作用。
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