摘要
绿僵菌（Metarhizium spp.）是一类应用十分广泛的昆虫病原真菌，可以在土壤中大量宿存，起到对害虫持续控制的作用。烟草是广东省的重要经济作物之一，烟草病虫害的发生却对烟草的产量和质量有重大影响。本研究以筛选出的对烟草田害虫有高毒力的绿僵菌菌株作为研究对象，对其进行了在烟草田间及温室土壤内的宿存动态研究，选择宿存能力较好的菌株与化学农药进行相容性测定，筛选出对绿僵菌生长没有影响的化学药剂与其混配，将其应用于田间试验，确定防效，为研究和提高绿僵菌制剂在烟田的应用价值和实际防治效果提供了科学依据。 1. 绿僵菌和白僵菌在广东不同烟区土壤中宿存动态研究 对19株绿僵菌和1株白僵菌在温室土壤中萌发动态进行研究，释放孢子60d后萌发率出现首次显著下降，180d后出现了第二次小幅度下降。大部分已降至 50%以下，只有Ma05、Ma09、Ma19、Ma22和Ma24菌株的萌发率高于50%。白僵菌一直呈现下降趋势，一年以后萌发率仅为15%。孢子最适保存温度为26℃，32℃以上不利于孢子萌发，4℃ 有利于孢子的保存。土壤含水量对绿僵菌宿存影响较大。5株绿僵菌和 1 株白僵菌 CFU（单位质量土壤菌落数量）在土壤中都呈现出先快速下降，然后有一个小幅回升的过程，其中以Ma09宿存能力最强。关于空间动态研究表明，3cm土层的CFU下降迅速，150d以后未检测到绿僵菌孢子。10-15cm土层的CFU呈现出开始快速下降，中期有个小幅波动甚至回升的趋势。广东三个烟草种植区五华、南雄和乳源的土壤都适于金龟子绿僵菌 Ma09 的宿存，并且可以持续宿存长达一年之久。 2. 绿僵菌胞外蛋白酶和几丁质酶活力与绿僵菌杀虫毒力的相关性分析 根据累计死亡率和时间建立了19株绿僵菌对二龄斜纹夜蛾（Spodoptera litura Fabricius）的毒力回归方程。测定了第 4d 胞外蛋白酶活力产生水平，分别二龄斜纹夜蛾第4d的累计死亡率及LT50进行相关性分析，相关系数分别为0.9209和0.7318，与累计死亡率正相关；几丁质酶活力产生水平与累计死亡率和LT50相关系数为0.4747和0.3718，没有相关性。根据胞外蛋白酶活力结果筛选出金龟子绿僵菌Ma09作为高毒力菌株。 3. 绿僵菌与化学药剂的相容性研究 测定了20种化学杀虫剂对金龟子绿僵菌Ma09生长的影响，结果表明大部分化学药剂对绿僵菌的生长都有一定的抑制作用。但部分低浓度杀虫剂会产生促进绿僵菌产孢。通过对生长抑制率、萌发抑制率和产孢抑制率三个指标对比，从中筛选出来三种与之有良好生物相容性的杀虫剂分别是：溴氰菊酯、氯虫苯甲酰胺和苏云金杆菌，这三种药剂均可以应用于混配剂的研制中。 4. 绿僵菌防治烟草田害虫效果研究 以100g/株剂量绿僵菌颗粒剂（每克颗粒剂含孢子5×106个）与底肥同时施用防治效果可以高达78.67%。以1g孢子粉加1L水浸泡150株烟苗的剂量进行浸渍法田间防效调查，防治效果可达90%以上。以每株烟淋入500mL孢子浓度为3.34×105个孢子/mL的孢悬液作为定根水淋入，防治效果可以达到64.58%。而以1.25×108个孢子/mL 浓度对烟苗进行喷灌，其防治效果可为 32.29%。通过对四种处理方法对地下害虫的防治效果进行比较，穴施法和浸根法的防治效果最好，灌根法次之，而喷灌法的防治效果最差。以5种不同制剂对烟草田斜纹夜蛾和烟蚜进行防治效果评估，绿僵菌孢悬液对烟蚜（Myzus persicaeSulzer）和斜纹夜蛾防治效果较低，不具备田间应用价值。处理15d后，水乳剂和油剂对斜纹夜蛾的防治效果为34.11%和36.06%，对烟蚜的防治效果分别为81.18%和70.86%。可以用于烟蚜的防治使用，但是不建议用于防治斜纹夜蛾等鳞翅目害虫。绿僵菌与氯虫苯甲酰胺混配剂对烟蚜和斜纹夜蛾处理15d后的防效分别为91.91%和83.06%，防治效果略高于单独使用氯虫苯甲酰胺，可将其应用于烟草田地上害虫的防治。
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