首页|Shkbp1对肺癌发生发展的作用及其机制研究

Shkbp1对肺癌发生发展的作用及其机制研究

扫码查看
原文链接
  • NETL
在癌症诊断和靶向治疗中，EGFR是癌基因这一观点被广泛认同。Shkbp1最近被发现，它是EGFR上游分子，可以保护EGFR免受降解。然而，在肿瘤生长过程中Shkbp1功能仍有待进一步研究。在本研究中，我们首先通过对来自TCGA数据库的494个匹配肺肿瘤组织和临近的非肿瘤组织的mRNA进行分析，发现Shkbp1与临床TNM的分期呈正相关。此外，通过利用免疫组化对肺癌组织芯片（125例）进行检测分析，发现其在临床肺癌样本中高表达，并且与淋巴结转移有关。机制上，利用Shkbp1敲除小鼠通过化学药物（乌拉坦）诱导建立肺腺癌自发模型, 研究Shkbp1在肿瘤发生发展中的作用，其结果显示：与对照组小鼠比较， Shkbp1基因敲除小鼠的肺部肿瘤数量和体积均显著减少。为进一步探讨其机制，利用siRNA干扰将Shkbp1在其高表达的肺癌细胞系中沉默，同样，利用腺病毒载体将Shkbp1在其低表达的细胞系中过表达，通过一系列细胞功能实验表明：在肺癌细胞系中，降低Shkbp1的表达抑制了细胞的迁移和侵袭，反之亦然。此外，还通过蛋白芯片检测，结果提示沉默Shkbp1会影响EGFR信号通路。上述一系列结果表明：Shkbp1与肿瘤的迁移和侵袭密切相关。此外，除了肿瘤细胞表达Shkbp1之外，我们还发现Shkbp1蛋白在许多类型免疫细胞中高表达，因此，利用Shkbp1敲除小鼠通过皮下移植肿瘤模型和尾静脉转移模型，探讨免疫细胞缺失Shkbp1后是否会影响肿瘤的生长。结果表明，敲除Shkbp1能降低肿瘤小鼠的肿瘤生长速度，提示免疫细胞的Shkbp1缺失亦能影响肿瘤的生长。进一步通过流式细胞术，证明Shkbp1会影响部分免疫细胞的亚型变化。 综上所述，得出以下结论： （1）Shkbp1在临床肺癌标本中高表达，且表达阳性率与肺癌的TNM 分期呈正相关，与淋巴结转移相关； （2） Shkbp1敲除小鼠药物诱导肺癌，肿瘤的生长受到抑制； （3）沉默Shkbp1抑制了肺癌细胞的迁移和侵袭；Shkbp1过表达促进肺癌细胞的迁移和侵袭； （4）Shkbp1影响了上皮间充质转化，其过程涉及到EGFR信号通路； （5）免疫细胞的Shkbp1缺失亦可以抑制肿瘤的生长。本研究揭示了Shkbp1促癌转移的作用，为研究Shkbp1在临床诊断和靶向药物中的重要作用提供新的实验基础和理论依据。

刘擎

展开 >

肺癌 Shkbp1基因 免疫细胞 亚型变化 动物实验

硕士

病理学与病理生理学

李江超

2018

广东药科大学

中文

R73