摘要
目的： 党参（RadixCodonopsis）是我国常用的一种传统补益中药，《中国药典》2015年版中规定其正品来源为桔梗科植物党参 Codonopsis pilosula（Franch.） Nan-nf. 素花党参 Codonopsis pilosula Nannf. Var. modesta（Nannf.）L. T. Shen 或川党参 Codonopsis tangshen Oliv.的干燥根，主要分布于我国东北、华北、西南和西北等地；具有健脾益肺、养血生津的功效，主要用于脾肺气虚、咳嗽虚喘、气血不足等症。 （1）党参基源多，且分布领域广，目前对不同基源党参间的差异研究较少，本文以3种法定基源（党参、素花党参和川党参）党参和3种非法定基源（管花党参、新疆党参和西藏党参）党参为研究对象，采用HPLC-PDA、LC-MS联用等现代分析技术结合统计学方法来研究6种不同基源党参间的化学成分差异，并找出能够使不同基源党参相互区分的差异成分，为不同基源党参的鉴别、品质分类和质量控制研究提供参考和依据。 （2）比较党参硫熏前后的化学成分变化，寻找党参硫熏前后的差异标志性成分。 方法： （1）参照《中国药典》2015年版一部党参项下相关要求测定不同基源党参和党参硫熏前后的水分、醇浸出物含量和二氧化硫残留量，为后续研究奠定基础。 （2）建立同时测定党参中党参炔苷、苍术内酯Ⅲ、腺苷和紫丁香苷4个主要活性成分含量的LC-MS分析方法，并比较这4种成分在不同基源党参与硫熏前后党参中的含量差异。 （3）采用HPLC-UV法对6种不同基源党参及党参硫熏前后指纹图谱进行对比研究。 （4）采用LC-MS联用仪分析测定6种不同基源党参及党参硫熏前后样品中的化学成分，并采用Xcalibur 3.0 软件（Thermo Fisher Scientific 公司，美国）对所采集的数据进行预处理，将预处理的数据导入Simca p 13.0软件进行数据处理分析，分析6种不同基源党参间及党参硫熏前后的差异，并找出差异的标志性成分。 结果与结论： （1）不同基源党参及党参硫熏前后共51批次样品的45%醇浸出物含量范围在40.04%~82.30%之间，其中3种法定基源党参的45%醇浸出物含量均大于55%，符合《中国药典》2015年版一部党参项下的浸出物含量要求。同时党参药材经硫磺熏蒸后，45%醇浸出物均有不同程度的升高，采用SPSS分析软件对硫熏前后党参浸出物的含量进行t检验分析，结果显示P ＜0.05，具有显著性差异，说明硫熏对党参质量具有一定的影响。 （2）6种不同基源党参样品中党参炔苷、苍术内酯Ⅲ、腺苷和紫丁香苷的差异明显，党参炔苷的含量在119.36~937.08 μg/ml之间，其中含量最高的为管花党参；苍术内酯Ⅲ的含量在0.19~56.97 μg/ml之间，其中含量最高的为党参；腺苷的含量在6.71~337.90 μg/ml之间，其中含量最高的为川党参；紫丁香苷的含量在0.61~110.73 μg/ml之间，其中以西藏党参含量最高；党参经硫磺熏蒸后，党参炔苷、腺苷和紫丁香苷的含量均有不同程度的降低，苍术内酯Ⅲ的含量升高。 （3）对比不同基源党参的对照指纹图谱，结果显示，三种法定基源党参所含化学成分类别基本相同，而三种非法定基源党参与三种法定基源党参相比均呈现不同的差异。进一步分析发现，在党参中，党参苷Ⅰ的峰高与党参炔苷的峰高的比值＞1，而在川党参和素花党参中，党参苷Ⅰ的峰高与党参炔苷的峰高的比值均＜1，说明这一比值可以作为党参区别川党参和素花党参差异的特征值。三种法定基源党参与管花党参相比，发现在管花党参的对照指纹图谱中，在5号峰（党参苷Ⅰ）与4号峰（色氨酸）之间多出一个峰，且在7号峰（党参炔苷）和8号峰之间多出一个峰，而在三种法定基源党参的对照指纹图谱中在这2处均未发现有相应的峰出现，可以以此特点作为管花党参区别三种法定基源党参的依据。 （4）建立了基于LC-MS联用技术结合多元统计分析不同基源党参间和党参硫熏前后的化学成分差异的方法，该方法能够快速识别不同基源党参间和党参硫熏前后的差异性成分；通过多元统计分析和单维统计分析，共筛选出76个影响党参基源及党参硫熏前后的差异性化学成分，鉴定出其中40个成分；筛选出3个成分为党参硫熏前后的主要标志性差异成分。对三种法定基源党参间的化学成分进行对比研究，得到能够作为川党参区别党参和素花党参差异的特征性成分—Codonopyrrolidium A；党参区别川党参的特征性成分—苍术内酯Ⅲ、Lobetyolinin 和苍术内酯Ⅱ，在三种法定基源党参内，党参与素花党参的化学成分相似，与川党参差异较大。三种法定基源党参与三种非法定基源党参相比，得到能够作为川党参区别新疆党参和西藏党参的特征性成分 5 个，分别为Codonopyrrolidium A、Codonopyrrolidium C、Codonopyrrolidium A异构体、352.211 9（16.40 min）、352.211 7（16.00 min）；党参区别管花党参、新疆党参和西藏党参的特征性成分4个，分别为352.211 7（16.00 min）、352.211 9（16.40 min）、Codonopiloside A和苍术内酯Ⅱ；素花党参区别管花党参、新疆党参和西藏党参的特征性成分2个，分别为Codonopiloside A和Codonopsinol B。管花党参与其他5种基源党参相比，得到能够作为管花党参区别其他5种基源党参的特征性成分—350.195 9（18.06min）；新疆党参与其他5种基源党参相比，得到能够作为新疆党参区别其他5种基源党参的特征性成分—238.143 5（1.32min）；西藏党参与其他5种基源党参相比，得到能够作为西藏党参区别其他5种基源党参的特征性成分—327.108 9（8.692 min）。对比党参经硫磺熏蒸前后的化学成分，发现硫磺熏蒸前后党参化学成分的种类未发生明显的改变，进一步分析，得到能够区分党参硫磺熏蒸前后差异的3个主要标志性成分分别为Codonopyrrolidium C、467.193 8（26.97min）和369.253 2（30.49min），党参经过硫磺熏蒸后这三个成分的含量发生大幅度的降低。
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