苦瓜子是葫芦科苦瓜属植物苦瓜（Momordica charantia L）的种仁，苦瓜是全株入药的食物，有“药用蔬菜”之称，特别是其果实和种仁有很强的药理活性。《本草纲目》中记载了苦瓜子的气味及药效，称其“苦甘无毒，益气壮阳”。迄今为止，国内外学者已经从苦瓜子中分离出多种蛋白质、多肽、三萜皂苷等成分，并显示出降血糖、抗肿瘤、抗病毒、降血脂、脂肪分解等药理活性。然而，对苦瓜子的多糖成分及其抗氧化和保肝活性研究报道甚少，本文从苦瓜子分离得到多种均一多糖，且表现出良好的保肝活性。 第一章 综 述 本章综述主要从三个方面进行阐述，第一部分介绍了苦瓜子的概况，主要阐述目前国内外关于苦瓜子成分的研究成果和现状，第二部分介绍了多糖的提取和药理活性。第三部分介绍了肝损伤动物模型的研究进展，围绕化学性肝损伤和免疫性肝损伤两部分展开总结和分析。天然多糖具有多种药理活性，但结构复杂，天然多糖的构效关系是目前的研究热点。 第二章 苦瓜子多糖提取工艺的优化 本章首次采用正交实验法对苦瓜子多糖的提取工艺进行了研究，以苦瓜子水提液中多糖的含量为考察指标，在单因素实验的基础上，采用L9(34)设计正交实验，确定了最佳提取工艺为：提取温度为90℃，提取时间为2.5 h，料液比为1：30，提取3次，采用苯酚硫酸法测定多糖的含量，测得苦瓜子多糖的含量为5.61%。 第三章 苦瓜子多糖的分离纯化及纯度鉴定 本章采用水提醇沉法提取苦瓜子多糖，三氯乙酸法除蛋白后经大孔树脂AB-8柱层析进行脱色和初步分离，再经DEAE-52纤维素柱层析得BMSP-A和BMSP-B两个主要洗脱峰，分别经Sephadex G200凝胶柱层析，得到BMSP-1和BMSP-2 两种多糖组分，经 HPLC 测定两个多糖组分为单一对称峰，表明 BMSP-1 和BMSP-2为均一组分，其平均相对分子量分别为4.47 KDa和120 KDa。对BMSP-1和BMSP-2进行纯度鉴定，采用紫外全波长扫描、糖含量、糖醛酸、蛋白质测定及化学定性实验，结果表明均不含核酸、淀粉，其中BMSP-1和BMSP-2的糖的含量分别为95.22%、93.67%，糖醛酸的含量分别为0.32%和0.8%，蛋白质含量分别为0.25%、0.31%。 第四章 苦瓜子两种均一多糖的初级结构鉴定 本章运用柱前衍生化测定单糖组成、红外光谱、1H-NMR、刚果红实验、原子力显微镜（AFM）和扫描电子显微镜（SEM）等现代分析手段首次对苦瓜子均一多糖BMSP-1和BMSP-2进行了结构初步鉴定。柱前衍生化测定单糖组成结果显示苦瓜子多糖BMSP-1由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖组成，其摩尔比为1.6：7.5：37.5：25.2：10.4：17.8，BMSP-2由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖组成，其摩尔比为32.3：25.4：21.5：20.8。红外光谱和 1HNMR图谱表明，BMSP-1和BMSP-2是主要由吡喃糖组成，其异头碳都是α型。刚果红实验结果分析BMSP-1和BMSP-2均无三螺旋结构。原子力显微镜（AFM）与扫描电子显微镜（SEM）图显示了苦瓜子两个均一多糖的基本形貌差异性不大。从初级结构的鉴定结果可看出，苦瓜子两种均一多糖只有单糖组成的不同，为之后高级结构鉴定奠定了基础。 第五章 苦瓜子多糖的抗氧化活性及对CCl4致小鼠急性肝损伤的保护作用 本章研究三种苦瓜子多糖BMSP、BMSP-1和BMSP-2对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基清除能力及总还原能力的测定实验反映三种苦瓜子多糖的体外抗氧化能力，结果表明苦瓜子多糖对4种自由基均具有良好的清除能力，其中BMSP-1抗氧化活性优于BMSP-2，且BMSP-1清除DPPH和羟基自由基的能力与Vc无显著性差异。将BMSP-1和BMSP-2（400、200、100 mg/kg）和BMSP（300mg/kg）对小鼠连续灌胃7天，通过灌胃给予1 % CCl4蓖麻油溶液建立小鼠急性肝损伤模型，测定脏器指数和血清中ALT、AST的活性以及肝脏组织中SOD、GSH及MDA水平，观察肝脏病理变化。在CCl4急性肝损伤模型中，与正常组相比，模型组脏器指数增大，血清中ALT和AST和组织中MDA显著性增大（P<0.05），而组织中GSH和SOD明显降低（P<0.05），说明造模成功。与模型组对比，各治疗组苦瓜子多糖均能拮抗肝脏肿大，均能使血清中ALT和AST酶活性、肝脏中MDA含量显著降低，肝脏SOD活性、GSH含量显著增加。其中，BMSP-1的中剂量组（200mg/kg）与阳性对照组西药的保肝活性相比无显著性差异。肝脏病理切片结果显示各剂量组肝组织损伤情况有不同程度的改善，与生化指标的测定结果相一致。以上结果表明不同单糖组分、不同分子量的多糖的保肝活性具有显著性差异性，其中，低分子量的、含有甘露糖和鼠李糖成分的BMSP-1保肝活性最佳，值得进一步深入研究。
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