摘要
研究背景 DAB2IP是一种新发现的抑癌基因，可通过介导多种肿瘤相关信号通路，影响肿瘤细胞的增殖、存活和凋亡。已有实验表明，DAB2IP在多种肿瘤中表达下调，如前列腺癌、肺癌、乳腺癌及消化道肿瘤等，但在食管癌中仍缺乏相关研究。本课题将DAB2IP和食管癌放射治疗联合进行研究，了解DAB2IP在食管癌中的表达及其对食管癌放疗敏感性的影响。旨在寻找合适的生物学标志物用于评估放疗预后，并可能作为治疗的新靶点。 研究目的 探讨DAB2IP（DOC-2/DAB2 interactive protein）对食管癌放疗敏感性的影响。 研究方法 随机选择140例食管癌患者活检标本，进行免疫组化染色，统计分析DAB2IP表达情况及其与临床病理学变量和放化疗敏感性的关系。构建DAB2IP质粒表达载体，并转入食管癌Kyse150细胞（Kyse150-DAB2IP）中设为实验组，将未处理细胞（Kyse150-vector）作为对照组。通过平板克隆实验计数细胞集落数，并利用线性二次模型曲线（L-Q）曲线进行拟合，通过不同剂量下食管癌细胞Kyse150的存活分数的计算，最后得出放疗增敏比（SER）；选用Annexin V-FITC/PI双染法通过流式细胞仪检测细胞的凋亡；使用蛋白免疫印迹技术检测凋亡蛋白Cleaved-PARP和Cleaved-Caspase3的表达水平；最后通过免疫荧光染色测定53BP1和γ-H2AX的表达，对比两组的DNA损伤情况。 研究结果 结合免疫组化的结果和统计分析可看出，在140例原发食管癌活检组织中DAB2IP低表达占75%，DAB2IP的表达与WHO分级、肿瘤大小、TNM分期及CRT反应均有关系（P＜0.05）；在Kyse150细胞中，过表达DAB2IP可引起细胞存活分数的下降，Kyse150-vector和Kyse150-DAB2IP的SF2分别为：0.66和0.43，DAB2IP过表达后放疗增敏比（SER）=1.52；流式细胞术中的凋亡细胞所占百分比和western blot中细胞凋亡蛋白（Cleaved-PARP和Cleaved-casepase3）表达均增加；免疫荧光结果显示射线所诱导的DNA双链损伤焦点形成明显增加。 研究结论 DAB2IP与食管癌放疗后细胞凋亡及DNA损伤相关，其低表达可引起食管癌的放疗抵抗，因而可说明DAB2IP可能是提高食管癌放疗敏感性的一个靶点。
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