摘要
大肠杆菌在人和动物的肠道菌群中扮演着重要的角色，可分为致病性大肠杆菌和非致病性大肠杆菌。致病性大肠杆菌与猪腹泻性疾病有着密切的联系，可以引起仔猪黄白痢、仔猪水肿病，具有高发病率、高死亡率的特点。虽然致病性大肠杆菌的致病机理比较复杂、致病类型比较多，但是已经有报道明确各致病类型的毒力因子，可以对其进行检测。由于国内抗生素的大量和不合理的使用，使大肠杆菌面临十分严峻的耐药现状，耐药菌株越来越多，耐药谱也不断变宽，多重耐药现象越来越普遍，对大肠杆菌引起的疾病的防治越来越困难。 为了了解我国不同地区猪源肠道致病性大肠杆菌的分布及耐药性情况，本研究依托2016年至2017年送诊于华中农业大学动物疫病诊断中心的部分猪肠道内容物及粪便，分离鉴定出126株肠道大肠杆菌，并对其进行了遗传群系鉴定、O抗原血清型鉴定、毒力基因鉴定、药敏试验；对实验室之前分离鉴定出的60株猪肠道大肠杆菌进行了遗传群系鉴定、毒力基因鉴定、药敏试验。对实验数据进行统计分析，为猪源肠道大肠杆菌引起的疾病的防控提供一定的参考。通过以上工作得到： （1）分离鉴定 对本研究分离鉴定的126株猪源肠道大肠杆菌进行了看家基因检测，所有分离株看家基因检测均为阳性；126株分离株主要来自于湖北、湖南、河南、安徽、广东等省份。 （2）遗传群系鉴定 对126株分离株和60株实验室保存菌株，共计186株肠道大肠杆菌菌株进行四重PCR遗传群系鉴定，A群系和B1群系的检出率最高，分别为33.87%和24.73%，其次是检出率为19.89%的C群系。相较于传统的三重PCR法本次还检测出属于新群系C、E、F及分支I的分离株共有49株，占到了总数的26.34%。 （3）O抗原血清学鉴定 将126株本次分离菌株进行O抗原血清型鉴定，并对126株本次分离株和60株实验室保存菌株进行O抗原血清型统计，186株菌株中，156株菌株成功定型，共包含19种不同的血清型，其中检出率最高的血清型是O78，其检出率为8.60%（16/186），其次是检出率为8.06%（15/186）的O104和检出率为7.53%（14/186）的O157。 （4）毒力基因及菌毛基因鉴定 对186株菌株进行16个毒力基因和4个菌毛基因检测，毒力基因中uidA基因的检出率最高，检出率为77.42%，其次是espc、aafll、st、H7基因，检出率分别为5.38%、4.84%、4.30%、4.30%，bfp、virF基因的检出率为0；菌毛基因中K99检出率高达12.37%，其次为K88检出率为3.23%。肠道大肠杆菌致病类型中，ETEC的检出率最高，占19.89%，其次为EAEC、EHEC、EPEC，检出率分别为8.06%、6.99%、4.84%，EIEC检出率最低为1.61%。 （5）药敏试验 本研究用20种常用抗生素对186株菌株进行药敏实验，分离株对其中4种抗生素的耐药率都超过了90%，分别为四环素97.73%，氨苄西林97.73%，复方新诺明92.61%和哌拉西林91.48%。有超过57%的分离株对10种及以上的药物耐过，对11种及以上药物耐过的菌株占总数的50.34%，其中有63株对多达13种以上药物耐过，多重耐药现象十分显著。
NETL