摘要
抗菌肽在先天免疫抵御病原体侵袭的过程中发挥着重要的作用，溶菌酶是一种重要的抗菌肽，溶菌酶通过水解细菌细胞壁主要成分肽聚糖的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰葡糖胺之间的β-1,4-糖苷键来行使杀灭细菌的功能。前期研究主要针对于揭示溶菌酶自身的免疫学功能，关于其协同其它免疫分子，共同参与免疫反应的报道还很少。在本研究中，课题组从克氏原螯虾体内鉴定得到一种溶菌酶，命名为PcLys-i3。用qRT-PCR分析PcLys-i3基因的组织分布和表达模式，发现PcLys-i3存在于检测的各组织中，在鳃、胃和肠组织中呈高表达的表达水平，副溶血弧菌、金黄色葡萄球菌或嗜水气单孢菌刺激后，PcLys-i3在鳃组织和肠组织中均有上调表达趋势。进一步研究表明PcLys-i3和PcFer蛋白可以增强小龙虾对细菌的清除能力，在小龙虾体内对PcLys-i3和PcFer进行干扰后，发现小龙虾对细菌的清除能力明显减弱。同时，研究表明体内注射PcLys-i3和PcFer重组蛋白能显著提高细菌感染后小龙虾的存活率。用Pull-down技术研究蛋白之间的相互作用，结果表明在体外PcLys-i3和PcFer蛋白可相互结合，对照标签蛋白未表现出相关活性。为了进一步揭示该溶菌酶的抗菌活性，通过细菌结合实验和液体抑菌实验来分析PcLys-i3和PcFer蛋白的抑菌活性，结果表明PcLys-i3和PcFer蛋白可以与细菌结合并抑制细菌的增殖。综上结果暗示了，PcLys-i3和PcFer共同参与了小龙虾抵御细菌感染的免疫过程。PcLys-i3在抗细菌免疫方面发挥的重要作用，为克氏原螯虾疾病预防提供了一定的理论支持，将其开发成产品以提高克氏原螯虾的养殖产量，具有很高的实践意义和潜在应用价值。
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