摘要
蛋白质的糖基化修饰是最常见、最重要的蛋白质翻译后修饰之一。目前，糖蛋白/糖肽的选择性富集研究中还有较多难点问题，如材料与糖肽的作用力不强，材料的作用位点有限，材料的富集选择性不佳等。本文针对这些问题，设计与制备了几种新型的功能化选择性分离材料，并对其制备过程、材料表征、糖肽富集条件、富集机理和富集性能做了系统的阐述和研究。本论文的工作主要包含以下几点: 一、设计合成了两类氨基酸修饰硅胶材料:天冬氨酸（酸性氨基酸）修饰硅胶材料和精氨酸（碱性氨基酸）修饰硅胶材料，对两个材料分别进行了ζ-电势和元素分析表征。通过人血清免疫球蛋白G，探索两个材料的最佳富集模式，并在复杂样品体系中进行了糖肽富集选择性的验证，实验表明精氨酸修饰硅胶材料与非糖肽间的静电排斥作用较强，从而导致非糖肽的吸附较少，表现出更好的糖肽富集选择性。 二、设计合成了氧化石墨烯/聚多巴胺邝日离子纤维素复合材料，通过探索反应的投料比优化材料的制备工艺。对材料进行了ζ-电势和透射电镜表征，并以人血清免疫球蛋白G为模型样品，探索该复合材料的富集方法，该方法具有简单、快速、通用性强等优点。将材料应用于糖肽的选择性富集，表现出了良好的检测限(1fmol/L)、选择性(IgG和BSA酶解液的摩尔比为1∶100)和富集容量(～150mg/g)，说明氧化石墨烯/聚多巴胺邝日离子纤维素复合材料具有较好的糖肽分离富集潜力。 三、设计合成了氧化石墨烯/聚乙烯亚胺/卡拉胶复合材料，利用ζ-电势、元素分析、X射线光电子能谱分析、扫描电镜分析、能量色散X射线荧光分析、红外光谱对复合材料进行了表征。以人血清免疫球蛋白G为模型样品，优化糖肽富集方法，考察糖肽富集性能，该材料表现出了良好的检测限(1fmol/L)、选择性（IgG和BSA酶解液的摩尔比为1∶500）、富集容量(～300mg/g)、富集重复性（20次）和富集回收率(90.8％，109.5％)。氧化石墨烯/聚乙烯亚胺/卡拉胶复合材料被进一步应用于实际生物样品（人血清提取蛋白和鼠肝蛋白）的糖肽富集，展现出较好的糖肽富集应用前景。
NETL