摘要
背景： 酰基甘油激酶AGK 位于人类染色体 7q34 区域，是一个多功能的脂质激酶，通过催化酰基甘油磷酸化产生溶血磷脂酸（LPA），从而参与到人体众多生物学过程中。最近多项证据表明，AGK表达失调与各种人类癌症的发生、发展有关。本课题研究了AGK对胃癌细胞增殖和癌变的影响，并深入研究了其中的分子作用机制。 方法: 采用免疫组织化学和蛋白质印迹分析检测了胃癌细胞系和胃癌组织中的AGK表达情况；基于免疫组化的结果分析了AGK表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系。通过检测上皮-间充质转变标志物以及CCK-8 ，集落形成， transwell侵袭和迁移实验以及异种移植模型明确AGK在胃癌中的生物学功能。之后，在胃癌细胞和组织中分析AGK和YAP1之间的相关性，并通过荧光素酶报告基因实验，染色质免疫共沉淀，免疫荧光和qRT-PCR等实验进一步研究两者之间的相互作用机制。 结果： 免疫组化和western blot实验均显示AGK的表达在胃癌细胞系和组织样品中上调，高表达AGK蛋白与胃癌患者组织分化不佳（P=0.009）并且与胃癌患者预后不良密切相关。过表达AGK能促进胃癌细胞的增殖、侵袭能力和上皮-间充质转变标志物的表达。相反，敲减AGK的表达则抑制胃癌细胞的增殖、侵袭以及裸鼠异种移植模型中的肿瘤形成能力。进一步研究其内在分子机制，我们发现AGK的表达与胃癌细胞和组织中的YAP1的表达呈正相关。转录共激活因子YAP1可通过TEAD与AGK基因启动子区域结合从而转录诱导AGK的表达。此外，AGK通过抑制Hippo信号通路激活进而诱导YAP1核定位增多并增强YAP1/TEAD的转录活性。 结论： 本研究表明AGK不仅是Hippo-YAP1通路的新靶点，而且它还通过抑制Hippo通路激活从而促进YAP1/TEAD转录活性，形成YAP1-AGK正反馈环路。此外，YAP1-AGK正反馈环路与胃癌的发生、发展密切相关。因此，本研究提示双重靶向AGK和YAP1可能成为未来胃癌治疗的新策略。
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