摘要
黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murr），是茄科(Solanaceae)枸杞属（Lycium）多年生多分枝棘刺灌木，主要分布于中国西北地区的青海、新疆、甘肃、内蒙等荒漠，盐碱地带，其特殊的生长特性对生态环境具有重要作用，与此同时，黑果枸杞还具有非常显著的生理活性，研究表明黑果枸杞的生理活性与果实中的多糖及花青素类成分相关。痛风是由嘌呤代谢异常引起组织损伤的异质性疾病，已成为现代社会的一种常见病。临床应用于治疗痛风的西药副作用大、中药则有效性低，因此寻找治疗痛风的新型药物具有重要意义。本论文通过UPLC-Q-orbitrap MS建立快速定性定量分析黑果枸杞多酚及花青素类化合物的方法。优化了高尿酸血症及急性痛风动物模型，在此基础上评估了黑果枸杞超微粉、黑果枸杞粗多糖提取物、黑果枸杞花青素富集物及富集物中最大组分矮牵牛素-3-Glu降尿酸与抗急性痛风作用。取得了以下研究结果和结论: (1)利用UPLC-Q-orbitrap MS建立了快速、准确、可靠定性定量分析黑果枸杞中25种酚酸类化合物及12种花青素类化合物的方法。在此基础上，在黑果枸杞中定性定量出18中酚酸类化合物，其中儿茶素、柚皮素、没食子酸、香草酸、2，4-二羟基苯甲酸、藜芦酸、苯甲酸、鞣花酸、水杨酸、二氢查尔酮类的根皮酚和原儿茶酸类的原儿茶酸11种酚酸类化合物首次在黑果枸杞中报道。在黑果枸杞中定性定量出10种花青素类化合物，其中5种为花色苷类化合物:飞燕草素-3-glu、矢车菊素-3-glu、矮牵牛素-3-glu、芍药花青素-3-glu及锦葵花青素-3-glu。其中5种花青素为飞燕草素、矢车菊素、矮牵牛素、天竺葵素及锦葵色素。这10种花青素类化合物全定量在黑果枸杞属于首次报道。在18种酚酸类化合物当中绿原酸含量居高:1094.85±21.54μg/g;在10种花青素类化合物当中矮牵牛素-3-glu含量居高:1263.23±15.97μg/g。 (2)优化了小鼠高尿酸血症及急性痛风动物模型，最终确定高尿酸血症动物模型造模剂为氧嗪酸钾，可成功造模剂量范围为:270-280mg/kg，本论文最终选择腹腔注射氧嗪酸钾280mg/kg为本研究的高尿酸血症动物模型造模剂量;最终确定急性痛风动物模型造模剂为尿酸结晶，造模剂量范围为:20mg/mL的造模浓度下，右后足皮下注射体积为0.2mL时或在40mg/mL的造模浓度下右后足皮下注射体积为0.1mL以上可以成功建立急性痛风动物模型。 (3)黑果枸杞超微粉在1g/kg给药量以上、黑果枸杞粗多糖、果枸杞花青素富集物在200mg/kg给药量以上具有降尿酸作用;矮牵牛素-3-Glu没有降尿酸作用。黑果枸杞超微粉及粗多糖提取物组降尿酸作用呈剂量相关性，黑果枸杞花青素富集物不呈剂量相关性。黑果枸杞超微粉在0.5g/kg给药量以上、黑果枸杞粗多糖在100mg/kg给药量以上、黑果枸杞花青素富集物在200mg/kg及矮牵牛素-3-Glu在80mg/kg给药量以上对肝脏中黄嘌呤氧化酶具有抑制作用。黑果枸杞超微粉、黑果枸杞粗多糖、矮牵牛素-3-Glu抑制肝脏中黄嘌呤氧化酶作用呈剂量相关性，黑果枸杞花青素富集物不呈剂量相关性。各有效剂量组对小鼠肝肾功及肝肾病理结构均没有显著影响。 (4)黑果枸杞超微粉在给药量1g/kg以上、黑果枸杞粗多糖、黑果枸杞花青素富集物在200mg/kg给药量以上及矮牵牛素-3-Glu在40mg/kg给药量以上具有抗急性痛风足肿胀炎症作用。黑果枸杞超微粉1g/kg给药量以上可显著降低PE2、IL-1β血清测定值及大鼠右后足中COX-1的mRNA表达值且呈剂量相关性，而TNF-α、IL-18及COX-1血清测定值在剂量0.5g/kg以上可显著降低但不呈剂量相关性;黑果枸杞粗多糖100mg/kg给药量以上可显著降低PE2、IL-18、IL-1β、COX-1血清测定值且呈剂量相关性，而TNF-α血清测定值在剂量100mg/kg给药量以上可显著降低但不呈剂量相关性;黑果枸杞花青素富集物灌胃剂量100mg/kg给药量以上可显著降低TNF-α、PE2、IL-1β血清测定值及大鼠右后足中COX-1的mRNA表达值且呈剂量相关性，而IL-18及COX-1不呈剂量相关性;矮牵牛素-3-Glu在剂量20mg/kg给药量以上可显著降低TNF-α、COX-1、IL-1β血清测定值及大鼠右后足中COX-1的mRNA表达值且呈剂量相关性，而IL-18及PE2血清测定值不呈剂量相关性。各有效剂量组对大鼠肝肾功及肝肾病理结果均没有显著性影响。 本论文旨在为黑果枸杞的综合利用及精深开发提供理论依据及开发建议。
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