摘要
西花蓟马Frankliniellaoccidentalis(Pergande)是世界上重要的农作物害虫和检疫对象,我国于2003年在北京首次发现。本研究通过光学显微观察和扫描电子显微镜观察,对南京地区54种植物花器中蓟马种类进行了调查鉴定,根据已报道的西花蓟马和烟蓟马线粒体COI基因序列设计特异性引物,建立了西花蓟马PCR快速检测方法,矛门用LA-PCR技术测定了西花蓟马的线粒体基因组全序列,并进行了分析,结果如下: 1.首次在南京地区发现外来入侵物种西花蓟马。通过光学显微镜和扫描电子显微镜形态特征观察和线粒体基因组的COI基因分子检测,证实西花蓟马在南京已普遍发生,在调查的54种植物中,25种有西花蓟马发生,西花蓟马种群数量达蓟马总量20%的有11种植物,超过30%有5种。西花蓟马不仅在园林植物上发生,在蔬菜作物部分品种上的种群数量也已经达到一定规模,如番茄、辣椒等。 2.利用扫描电子显微镜观察,提高了西花蓟马形态鉴定的准确性,可以充分显示扫描电镜在观察细微结构上的优势,如:触角各节、头和前胸背片,腹部第Vlll节背片等的观察,获得了光学显微镜图片较难达到的昆虫体表细微结构的立体信息。 3.本研究采用摘取整个花器的方法采集蓟马,可以获得花器中的全部虫源,能够准确的获得访花蓟马的种群数量,另一方面,通过寄主花器的室内鉴别,可以准确认定寄主植物的种类,克服了以往采用的盆拍法采集虫源,难以获得全部蓟马样本和现场判别寄主可能出错的不足。 4.PCR快速检测研究表明,该方法灵敏度高、特异性强,不仅可以检测到单粒蓟马卵,甚至1/120头的成虫仍可准确检测。本研究设计的西花蓟马和烟蓟马的特异性引物,不仅能够分别准确检测西花蓟马和烟蓟马,还可将与其亲缘关系较近的蓟马种类区分开。 5.西花蓟马线粒体基因组为闭合环状结构,序列全长14889bp,碱基组成分别为6101A(40.98%),1646C(11.06%),5452T(36.62%),1690G(11.35%);由13个蛋白质编码基因、22个tRNA基因、2个rRNA基因和3个控制区组成。其中,3个蛋白质编码基因和3个tRNA基因由L链编码,其余基因均由H链编码。蛋白质基因的起始密码子均为典型的起始密码子ATN。ND1、ATPS、ND4和ND4L基因使用了不完全终止密码子T。本研究利用西花蓟马线粒体全基因组序列,预测了22个tRNA基因的二级结构。