摘要
背景: 骨关节炎是一种退行性关节疾病，可能导致关节软组织损伤和其他组织的形态学损害，该病影响全球约2.37亿人口[1]。然而，保守治疗在晚期骨关节炎患者作用甚微。因此，寻找该病潜在风险因子来预防，和改善早期病程的治疗变得更加重要。骨软骨单元结构包括软骨，软骨下骨和钙化软骨，它们在负重或者关节运动过程中的负荷转移中起重要作用[6]。然而，骨软骨单元也会随着骨关节炎的进展而演变。研究表明，通过抑制骨吸收来减弱了高骨重塑型小鼠的骨关节炎进展[13]。此外，卤夫酮可以通过抑制软骨下骨中的血管形成来延缓骨关节炎[14]。因此，骨软骨单元是治疗骨关节炎的合理且有效的靶点。二十二碳六烯酸是普遍存在且易于获取的。其补充剂在日常生活中很受欢迎，特别是在孕妇和哺乳期妇女中[16]。此外，横断面研究显示，绝经后的妇女摄入的n-3多不饱和脂肪酸量与其骨矿物质密度呈正相关关系[17]。并且，n-3多不饱和脂肪酸补充剂具有抑制动物病理性视网膜血管形成[18]。尽管二十二碳六烯酸有许多益处，但是关于其对骨关节炎的作用知之甚少。因此，在本研究中，旨在确定二十二碳六烯酸是否具有维持骨软骨单元的完整性和保护软骨层功能性的作用。 目的: 研究目的是通过对ACLT诱导的大鼠补充二十二碳六烯酸（DHA）来验证该动物骨软骨单元中的骨重塑和血管形成是否受到抑制。 方法: 将12周龄雄性SD大鼠随机分为三组：假手术组+载体处理组，ACLT手术+载体处理组，或ACLT手术+DHA处理组。通过微CT和组织形态学检查胫骨标本的骨软骨单元的微结构和脉管系统。此外，对RAW264.7细胞和HUVEC中进行了功能和表达测定。最后，使用国际骨关节炎协会的改良版的标准和组织学分析来评估关节软骨层的状态。 结果: 骨软骨单元的显微结构参数显示DHA处理的大鼠的骨量减少和血管生成少于载体处理的大鼠。与ACLT手术+载体处理组相比，在ACLT手术+DHA处理组中的大鼠的骨软骨单元中用TRAP(p=0.005)，RANKL(p=0.001)，CD31(p=0.0386)和EMCN(p=0.0249)标记的免疫荧光阳性细胞减少。此外，与RANKL处理组相比，用RANKL+DHA处理组的RAW264.7细胞中TRAP染色细胞的数量(p=0.0139)、骨吸收坑的面积(p=0.0002)、以及TRAP(p＜0.0001)、CTSK(p=0.0195)、MITF(p=0.0002)和NFATc1(p=0.0012)的mRNA表达降低。而且，DHA抑制HUVEC的管形成、细胞增殖(p=0.0148)和迁移(p＜0.0001)、以及VEGF-CmRNA(p=0.0008)和VEGFR2蛋白(p=0.0033)表达。最后，OARSI评分(p=0.0021)和MMP-13(p=0.0008)和COLX(p=0.0011)表达的降低表明DHA减缓了关节软骨退变。 结论: DHA具有抑制ACLT诱导大鼠的骨软骨单元骨重建和血管形成的能力，这可能有助于保护关节软骨层。
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