摘要
研究目的：探讨1-磷酸鞘氨醇(SIP)及其受体在抑制心肌细胞自噬、抑制心肌细胞肥大、保护心脏功能中所起的作用。 研究方法：使用S1P刺激饥饿及PE处理的心肌细胞，通过测定心肌细胞内自噬小体数量、自噬相关蛋白、重要的自噬功能基因表达情况研究其在心肌细胞自噬中的作用，通过测定心肌细胞面积、肥大相关基因表达情况研究其在心肌细胞肥大中的作用。随后，使用不同siRNA分别敲低小鼠心肌细胞三种S1P受体的表达，以确定心肌细胞中介导S1P信号通路的受体类型。最后，通过Cas9技术在小鼠心脏中敲除1-磷酸鞘氨醇受体1(S1PR1)，通过测定小鼠心肌细胞自噬、心肌细胞肥大程度及心脏功能，验证S1PR1受体在心脏自噬及心肌肥厚中发挥的作用。 研究结果：SIP干预后饥饿诱导的心肌细胞自噬及PE诱导的心肌细胞肥大明显减弱，表现为心肌细胞内自噬小体形成减少、自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、P62及重要的自噬功能基因Atg5、Atg12、Beclin1和LC3B表达减少，心肌细胞相对面积减小，并且心房钠尿肽(atrial natriuretic factor，ANF)、脑利钠肽(brain natriuretic peptide，BNP)、β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain，β-MHC)及骨骼肌和心肌肌动蛋白(skeletal muscle and cardiac actin，SKA)等胚胎期基因的表达水平减低。S1PR1敲低后心肌细胞自噬及肥大程度较对照组、S1PR2及S1PR3敲低组明显加重。体内敲除心肌细胞S1PR1后，压力负荷诱导的心肌自噬、心肌肥厚及心脏功能降低均较对照组明显加重。 研究结论：SIP可通过激活S1PR1抑制心肌细胞自噬从而抑制心肌细胞肥大，保护压力负荷小鼠心脏功能。
NETL