摘要
黄瓜是一种世界性蔬菜，疫病是华南地区黄瓜生产中的主要土传病害之一。疫病的病原菌种类繁多且遗传变异快，防治十分困难。油菜素甾醇类化合物（BRs）在植物生长发育及生物和非生物胁迫响应中具有重要的调节作用。本研究以两个中抗品种‘汕头青瓜’（R1）、‘改良改良长春密刺’（R2）和两个感病品种‘中农20号’（S1）、‘早青二号’（S2）为试材，通过外施24-表油菜素内酯（EBR）预处理不同抗性的黄瓜幼苗，2d后灌根接种5*103瓜类疫霉菌游动孢子悬浮液，综合分析不同处理黄瓜幼苗下胚轴显微结构变化情况，旨在探明EBR诱导黄瓜抗疫病的植物组织防卫反应机制。研究结果如下： （1）疫霉菌灌根接种5d后调查病情指数，R1、R2病情指数分别为25.83%、34.90%，抗病评价为中抗，S1、S2病情指数分别为51.62%、58.86%，抗病评价为感病。外源EBR预处理显著降低了不同抗性品种的病情指数，抗病组黄瓜R1和R2幼苗的病情指数分别下降了12.64%和17.39%，感病组黄瓜S1和S2幼苗分别下降了17.20%和30.73%。 （2）与S1、S2相比，R1品种下胚轴表现出短而粗的特征。进一步调查病原菌接种后植株下胚轴生长情况，发现无论未接种还是接种病原菌，外源EBR均不同程度的促进了抗、感黄瓜下胚轴直径的增加，但是对下胚轴的伸长生长无显著作用。 （3）运用石蜡切片技术和番红-固绿染色法观察黄瓜下胚轴横切面与纵切面，发现：①外源EBR处理和疫霉菌侵染对黄瓜幼苗下胚轴表皮细胞和皮层细胞的分裂均有促进作用，表现出细胞数目增多，细胞排列更加紧凑；薄壁细胞壁有不同程度的增厚，细胞形态更加清晰；下胚轴横切面中维管束数目增多。对比CK处理，EBR预处理后接种疫霉菌（EBR+P）处理中表现最为明显，其次是单一激素（EBR）处理，最后是单一疫霉菌接种（P）处理。②从下胚轴维管束中韧皮纤维和导管番红染色情况可以看出，对比CK处理，EBR+P处理中韧皮纤维和导管红色最深，其次是单一EBR处理，最后是单一P处理，抗、感品种中表现基本一致。③测量黄瓜下胚轴横切面结构表明，与CK相比，P、EBR和EBR+P处理黄瓜幼苗下胚轴髓腔面积显著降低，但此三个处理间无显著差异。 （4）运用石蜡切片技术和苯胺蓝染色法观察黄瓜幼苗下胚轴中胼胝质的变化情况发现，抗病黄瓜幼苗受疫霉菌侵染后，其下胚轴中胼胝质积累量的变化不明显，而外源EBR预处理可促使胼胝质积累明显增多。相反，感病黄瓜幼苗在疫霉菌侵染后，幼苗下胚轴中胼胝质的积累量明显增加，EBR+P积累量最多，而EBR处理对感病黄瓜幼苗下胚轴中胼胝质积累的影响较小。 （5）运用qRT-PCR检测部分黄瓜胼胝质合成酶相关基因的相对表达情况，结果发现，CalS5（Csa7G429540、Csa2G302180、Csa2G302250）和CalS1（Csa7G429560）在两个抗病品种黄瓜幼苗下胚轴受EBR诱导，相对表达量显著高于CK。CalS12（Csa7G036450）基因仅在抗病品种R2中受EBR诱导，相对表达量显著高于CK。CalS3（Csa3G073810）基因仅在抗病品种R1中受EBR诱导，相对表达量显著高于CK。
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